牛腔前卵泡體外培養(yǎng)研究.pdf

1、本實驗以從屠宰場收集到的黃牛卵巢中分離得到的腔前卵泡卵母細胞為材料，采用普通微滴法和多聚賴氨酸鋪層法對黃牛腔前卵泡進行體外培養(yǎng)研究，結果如下：　　比較了機械分離法和酶結合機械法分離腔前卵泡卵的效果，用機械分離法每個卵巢回收的卵泡數(shù)平均為12.6±3.6個(共分離卵巢15個)，極顯著低于酶結合機械法的28.2±8.6個(共分離卵巢15個)(P＜0.01)；而回收的正常卵泡兩種方法間差異不顯著(P＞0.05)。綜合比較表明分離腔前卵泡卵的

2、效果酶結合機械法優(yōu)于機械法?！　嶒灪Y選了適宜的基礎培養(yǎng)液和牛腔前卵泡體外培養(yǎng)的方法?！　≡趯嶒灪Y選出的適宜基礎培養(yǎng)液中添加EGF50ng/L、IGF-175ng/L時腔前卵泡的存活率最高，達到66.4％，極顯著高于對照組的44.6％(P＜0.01)，而卵母細胞直徑的平均增幅也達到最大(45.92μm)，顯著高于對照組的28.56m(P＜0.05)。結果表明，聯(lián)合添加EGF、IGF-1能夠促進腔前卵泡體外培養(yǎng)的存活率和卵母細胞的生長

3、?！　≡趯嶒灪Y選出的適宜基礎培養(yǎng)液中添加了不同劑量的FSH、17β-E2以探討其對牛腔前卵泡體外培養(yǎng)的影響。　　在實驗篩選出的適宜基礎培養(yǎng)液中添加50mg/LEGF+75mg/LIGF-1+0.25mg/LFSH+1mg/L17β-E2體外培養(yǎng)腔前卵泡，結果表明，培養(yǎng)12天卵母細胞直徑平均增幅達到62.84μm，而培養(yǎng)12天后腔前卵泡成腔率為8.76％。說明DMEM+5.00mg/胰島素+5.00mg/L轉鐵蛋白+5.00μg/L硒