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1、本試驗(yàn)采用免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),檢測(cè)了骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)在山羊卵泡中的定位及在體外培養(yǎng)過程中BMPRⅡ mRNA的相對(duì)表達(dá)豐度,探討了BMPRⅡ基因?qū)β涯讣?xì)胞體外成熟的影響,旨在為研究BMPRⅡ基因的生物學(xué)功能提供理論依據(jù)。此外,試驗(yàn)優(yōu)化了山羊卵泡卵母細(xì)胞體外成熟和體外受精體系,旨在為進(jìn)一步完善山羊胚胎體外生產(chǎn)體系提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。結(jié)果表明:
1.BMPRⅡ mRNA在山羊卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合體在體外成
2、熟全過程中均有表達(dá),且呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),其表達(dá)峰值出現(xiàn)在IVM12h,與卵丘開始擴(kuò)散的時(shí)間一致。
2.BMPRⅡ的表達(dá),卵母細(xì)胞與卵泡液中均呈強(qiáng)陽(yáng)性信號(hào),而各級(jí)卵泡中的卵泡細(xì)胞BMPRⅡ的表達(dá)相對(duì)較弱。
3.本研究結(jié)果提示BMPRⅡ可能在山羊卵母細(xì)胞體外成熟和卵丘細(xì)胞擴(kuò)散中可能起著重要作用,并可進(jìn)一步證明BMPRⅡ也同樣是BMP15和GDF9的受體。
4.在體外培養(yǎng)體系中,不同濃度血清(1
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