L929細(xì)胞中U17HG對RCC1的負(fù)調(diào)控及其對TNF引起的細(xì)胞死亡的影響.pdf

1、小核仁RNA宿主基因(small nucleolar RNA host genes，snoRNA-HGs)編碼的蛋白主要在核糖體蛋白的翻譯中起重要作用。但是還有一些snoRNA-HGs不具有蛋白的編碼能力，比如UHG、U17HG、U19HG等，它們的生物學(xué)功能目前尚不清楚。本文應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒隨機插入介導(dǎo)基因失活的方法，以鼠纖維原細(xì)胞L929為材料，篩選在腫瘤壞死因子-α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)誘導(dǎo)細(xì)

2、胞死亡過程中起重要作用的基因。我們獲得了一株TNF抗性細(xì)胞株(U17HGmut)，逆轉(zhuǎn)錄病毒插入到U17HG(U17 host gene，U17HG)的第一個內(nèi)含子中，實時PCR檢測發(fā)現(xiàn)U17HG mRNA表達(dá)水平增加了，而其下游染色體凝聚調(diào)控蛋白(regulator of chromosome condensation，RCC1)的表達(dá)水平卻減少了。進(jìn)一步研究證明了在L929細(xì)胞中U17HG對RCC1具有負(fù)調(diào)控的作用。RCC1是Ras

3、相關(guān)核蛋白(Ras-related nuclear protein，Ran)的鳥嘌呤核苷酸交換因子，在細(xì)胞核內(nèi)RCC1催化RanGDP生成RanGTP，胞質(zhì)中RanGDP和細(xì)胞核內(nèi)RanGTP比例的平衡協(xié)調(diào)在細(xì)胞分裂過程中具有重要作用。我們發(fā)現(xiàn)L929細(xì)胞中RCC1是TNF誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡所必須的。L929細(xì)胞在TNF刺激下會出現(xiàn)瞬時的G2/M期細(xì)胞的積聚，而G2/M期的細(xì)胞對TNF的敏感性顯著增強；而當(dāng)細(xì)胞中RCC1的表達(dá)水平下降后，細(xì)