用分子標(biāo)記鑒定轉(zhuǎn)Bt基因棉和檢測(cè)純度的技術(shù)研究.pdf

1、 本研究以當(dāng)前生產(chǎn)上廣泛使用的4個(gè)棉花品種為試材，在DNA快速提取方法、PCR反應(yīng)體系、RAPD檢測(cè)技術(shù)體系和SSR檢測(cè)技術(shù)體系四個(gè)方面進(jìn)行了研究，探討了利用分子標(biāo)記進(jìn)行轉(zhuǎn)Bt基因棉的品種鑒定和純度檢測(cè)技術(shù)，并與傳統(tǒng)的卡那霉素法相比較，為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉種子快速檢測(cè)提供了依據(jù)。通過研究，得到如下結(jié)果： 1.卡那霉素法檢測(cè)與PCR技術(shù)檢測(cè)結(jié)果比較。用卡那霉素對(duì)轉(zhuǎn)基因棉花中棉所41和國(guó)抗一號(hào)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果分別為89﹪和86﹪。與用

2、PCR技術(shù)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)二者結(jié)果趨勢(shì)一致，但卡那霉素的檢測(cè)結(jié)果偏低。 2.建立了快速提取DNA的方法。 3.PCR技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉。對(duì)用于轉(zhuǎn)基因抗蟲棉檢測(cè)的PCR擴(kuò)增程序進(jìn)行了改進(jìn)，使擴(kuò)增時(shí)間縮短，特異性增強(qiáng)，建立了適用于DNA粗提液的相應(yīng)PCR反應(yīng)體系。 4.RAPD檢測(cè)技術(shù)體系研究。對(duì)影響RAPD過程的各因素進(jìn)行了優(yōu)化研究，初步建立了適用于種子DNA粗提液的RAPD反應(yīng)體系。 5.SSR檢