有機(jī)磷農(nóng)藥的酶免疫化學(xué)研究.pdf

1、農(nóng)藥小分子的酶免疫化學(xué)研究可以是針對(duì)單個(gè)化合物制備特異性抗體,也可以針對(duì)一類(lèi)化合物制備"簇特異性"抗體從而進(jìn)行多殘留免疫分析.該論文第一部分首次較為系統(tǒng)地針對(duì)常用的二甲氧基(硫代)磷酸酯類(lèi)農(nóng)藥化合物的共性結(jié)構(gòu)進(jìn)行了多殘留酶免疫分析研究,合成了三種具有共性結(jié)構(gòu)特征的半抗原,并成功地得到了兩種具有"寬譜特異性"的抗體.根據(jù)中國(guó)常用的有機(jī)磷酸酯類(lèi)農(nóng)藥的結(jié)構(gòu)特征,將它們歸為三類(lèi):(1)芳環(huán)硫代磷酸酯類(lèi),如甲基對(duì)硫磷、殺螟硫磷、甲基嘧啶磷等;(2

2、)直鏈硫代磷酸酯類(lèi),如樂(lè)果、馬拉硫磷等;(3)乙烯基磷酸酯類(lèi),如久效磷、磷胺、速滅磷等農(nóng)藥,分別針對(duì)它們的共性結(jié)構(gòu)合成了三種半抗原(分別簡(jiǎn)稱(chēng)為MP、SP和VP),以期得到對(duì)結(jié)構(gòu)類(lèi)似化合物具有"寬譜特異性"的多克隆抗體.針對(duì)這三種半抗原的活性基團(tuán)特征,通過(guò)直接氨解法、重氮化法、混合酸酐法或活性酯法等方法,使之與不同的載體蛋白偶聯(lián),分別合成了人工抗原.以各種半抗原與BSA的偶聯(lián)物作為免疫原進(jìn)行動(dòng)物免疫,分別得到了針對(duì)半抗原MP和SP的高效價(jià)

3、抗體(VP免疫未成功).獲得的MP和SP抗血清與相應(yīng)包被原結(jié)合的中點(diǎn)效價(jià)均為1:12800倍,終點(diǎn)效價(jià)均大于50000倍.采用間接競(jìng)爭(zhēng)性ELISA方法,分別以甲基對(duì)硫磷和SP半抗原作為小分子競(jìng)爭(zhēng)物,對(duì)其免疫分析條件進(jìn)行了試驗(yàn)和篩選,在優(yōu)化條件下建立了針對(duì)甲基對(duì)硫磷和SP半抗原的標(biāo)準(zhǔn)抑制曲線和回歸方程.在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了其它結(jié)構(gòu)類(lèi)似化合物的抑制試驗(yàn).毒死蜱是一種中等毒性的廣譜有機(jī)磷農(nóng)藥,在國(guó)內(nèi)外農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中大量使用.該論文第二部分在國(guó)內(nèi)首次進(jìn)