有機磷農(nóng)藥的酶免疫化學研究.pdf

1、農(nóng)藥小分子的酶免疫化學研究可以是針對單個化合物制備特異性抗體,也可以針對一類化合物制備"簇特異性"抗體從而進行多殘留免疫分析.該論文第一部分首次較為系統(tǒng)地針對常用的二甲氧基(硫代)磷酸酯類農(nóng)藥化合物的共性結構進行了多殘留酶免疫分析研究,合成了三種具有共性結構特征的半抗原,并成功地得到了兩種具有"寬譜特異性"的抗體.根據(jù)中國常用的有機磷酸酯類農(nóng)藥的結構特征,將它們歸為三類:(1)芳環(huán)硫代磷酸酯類,如甲基對硫磷、殺螟硫磷、甲基嘧啶磷等;(2

2、)直鏈硫代磷酸酯類,如樂果、馬拉硫磷等;(3)乙烯基磷酸酯類,如久效磷、磷胺、速滅磷等農(nóng)藥,分別針對它們的共性結構合成了三種半抗原(分別簡稱為MP、SP和VP),以期得到對結構類似化合物具有"寬譜特異性"的多克隆抗體.針對這三種半抗原的活性基團特征,通過直接氨解法、重氮化法、混合酸酐法或活性酯法等方法,使之與不同的載體蛋白偶聯(lián),分別合成了人工抗原.以各種半抗原與BSA的偶聯(lián)物作為免疫原進行動物免疫,分別得到了針對半抗原MP和SP的高效價

3、抗體(VP免疫未成功).獲得的MP和SP抗血清與相應包被原結合的中點效價均為1:12800倍,終點效價均大于50000倍.采用間接競爭性ELISA方法,分別以甲基對硫磷和SP半抗原作為小分子競爭物,對其免疫分析條件進行了試驗和篩選,在優(yōu)化條件下建立了針對甲基對硫磷和SP半抗原的標準抑制曲線和回歸方程.在此基礎上進行了其它結構類似化合物的抑制試驗.毒死蜱是一種中等毒性的廣譜有機磷農(nóng)藥,在國內(nèi)外農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中大量使用.該論文第二部分在國內(nèi)首次進