26454.丹參酮生物合成途徑相關(guān)酶基因的克隆和特征分析

1、上海師范大學(xué)碩士學(xué)位論文丹參酮生物合成途徑相關(guān)酶基因的克隆和特征分析姓名：王敬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：開(kāi)國(guó)銀200904012、成功地從丹參中克隆出了泐格，瑾因，該基因全長(zhǎng)2522bp，包含一個(gè)完整的2175bp的開(kāi)放閱讀框，編碼724個(gè)氨基酸殘基。根據(jù)蛋白比對(duì)的結(jié)果，SmDXSII基因編碼的氨基酸序列與其它物種中報(bào)道的已知DXSII蛋白序列具有高度的同源性。序列分析發(fā)現(xiàn)該蛋白含有一個(gè)硫胺素焦磷酸鹽綁定區(qū)域(thiami

2、npyrophosphatebindingdomain)，一個(gè)保守的嘧啶綁定區(qū)域(DRAGdomain)，和一個(gè)保守的組氨酸殘基。組織特異表達(dá)分析結(jié)果表明，觥，瑾因不是一個(gè)組成型表達(dá)的基因，觥，瑾因在根里表達(dá)量最高，在莖和葉里幾乎檢測(cè)不到表達(dá)。丹參毛狀根誘導(dǎo)處理結(jié)果表明，泐格，，基因至少在轉(zhuǎn)錄水平上受到誘導(dǎo)調(diào)控，是一個(gè)誘導(dǎo)應(yīng)答型的基因，MJ、Ag均能非常有效地誘導(dǎo)鐋砒5I廠瑾因表達(dá)水平的上調(diào)。其中MJ的誘導(dǎo)效應(yīng)相對(duì)顯著。3、成功地從丹參

3、中克隆出了砌翩般5基因，該基因全長(zhǎng)1655bp，包含一個(gè)完整的1383bp的ORF，編碼460個(gè)氨基酸殘基。根據(jù)蛋白比對(duì)的結(jié)果，砌翩躲5基因編碼的氨基酸序列與其它物種中報(bào)道的已知HMGS蛋白序列具有高度的同源性。組織特異性表達(dá)分析結(jié)果表明，該基因在丹參中為組成性表達(dá)，在葉片中的表達(dá)最為強(qiáng)烈，在莖部的表達(dá)次之，在根里的表達(dá)最弱。丹參毛狀根誘導(dǎo)處理結(jié)果表明，砌棚舨灌因至少在轉(zhuǎn)錄水平上受到誘導(dǎo)調(diào)控，也是一個(gè)誘導(dǎo)應(yīng)答型的基因，MJ、YE均能誘導(dǎo)

4、＆搠段噬因表達(dá)水平的上調(diào)。本文系統(tǒng)地從丹參中克隆到了三個(gè)與丹參酮生物合成相關(guān)的基因，為今后利用基因工程技術(shù)改良丹參、提高丹參酮類(lèi)次生代謝產(chǎn)物含量打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)；分析了丹參酮生物合成途徑中的三個(gè)相關(guān)酶基因在丹參不同部位的組織特異表達(dá)特征，為深入了解丹參酮類(lèi)成分在不同部位的含量差異的遺傳基礎(chǔ)提供了初步的分子證據(jù)；比較分析了MJ、YE和Ag三種誘導(dǎo)子對(duì)丹參酮生物合成途徑的調(diào)控效應(yīng)，從基因表達(dá)水平上探討了這些誘導(dǎo)子對(duì)丹參酮生物合成途徑可能的分