枯草芽孢桿菌泰山株的分離鑒定及其對黃曲霉毒素的降解作用研究.pdf

1、黃曲霉毒素(Aflatoxin，AF)是由黃曲霉、寄生曲霉和特異曲霉等多種真菌產生的代謝產物，是一類分子真菌毒素，它們的結構和理化性質都非常相似，是一種強致癌物質，有劇毒，迄今發(fā)現的各種真菌毒素中最穩(wěn)定、毒性最強的一種為AFB1。黃曲霉毒素廣泛存在于各類谷物飼料中，危害巨大，畜禽食入含AFB1污染的飼料能夠降低動物的生產性能、并引發(fā)一系列的疾病，可以通過食物鏈間接進入人體并具有極強的致癌作用，嚴重威脅人類健康。
　　目前，用生物學

2、方法降解飼料中黃曲霉毒素的應用非常少，迄今為止，還沒有關于生物酶降解飼料中黃曲霉毒素飼料添加劑的相關報道。因此，分離得到到具有較高黃曲霉毒素降解效率的菌株是我們未來的研究發(fā)展方向。
　　本試驗首先對從中國普通微生物保藏中心(CGMCC)購買的一株枯草芽孢桿菌進行了黃曲霉毒素B1降解的作用研究，然后從泰山土壤中篩選出具有降解黃曲霉毒素B1作用的枯草芽孢桿菌，經16S rRNA基因測序鑒定為枯草芽孢桿菌，最終確定1株具有較高降解作用的

3、枯草芽孢桿菌，命名為枯草芽孢桿菌泰山株。利用該菌株對黃曲霉毒素B1進行了降解率、活性組分及性質的確定、降解黃曲霉毒素B1條件的優(yōu)化和降解飼料中黃曲霉毒素效果的研究。
　　結果表明，由中國普通微生物保藏中心(CGMCC)購買的枯草芽孢桿菌對黃曲霉毒素B1的降解效率為68％，發(fā)酵后的上清液對黃曲霉毒素B1的降解活性最高;枯草芽孢桿菌泰山株對黃曲霉毒素B1的降解率達90.28％，其中，枯草芽孢桿菌泰山株發(fā)酵后的上清液對AFB1的降解活性

4、最高，確定發(fā)酵后的上清液中存在解毒活性組分;對解毒活性物質進行加熱和蛋白酶K變性處理后，解毒活性顯著降低，表明起解毒作用的活性物質是其分泌的一種胞外酶;對降解條件進行了優(yōu)化:6％接種量，發(fā)酵溫度為30℃，pH值7.0，發(fā)酵時間72 h;試驗進一步證明枯草芽孢桿菌泰山株，能降解霉變飼料中的AFB1，可在飼料或者食品行業(yè)進行應用。
　　枯草芽孢桿菌是國際公認的安全的飼料添加菌種，本研究從泰山土壤中分離到對黃曲霉毒素B1有著高達90.2