D型產(chǎn)氣莢膜梭菌類毒素疫苗的研制及保護效果的評價.pdf

1、D型產(chǎn)氣莢膜梭菌菌主要產(chǎn)生α、ε毒素，可以引起羔羊、綿羊、山羊、牛以及灰鼠的腸毒血癥。該病發(fā)病急、病程短、死亡率高，因此動物一旦發(fā)病往往尚未得到有效治療即發(fā)生死亡。因此為了切實有效的控制本病的傳播，必須采取切實有效的預(yù)防的措施。目前使用的商用聯(lián)苗注射免疫劑量較大，接種家畜的反應(yīng)較重，而且部分疫苗的免疫效果存在爭議，質(zhì)量需要做進一步改進，因此研究免疫保護效果好、無毒副作用的疫苗來預(yù)防本病的發(fā)生是非常必要的。
　　本研究對D型產(chǎn)氣莢膜

2、梭菌標準菌種(NCTC8346)進行復(fù)蘇、增菌、產(chǎn)毒，再用0.22um蔡氏濾器過濾除去菌體得到毒素溶液，然后用甲醛對毒素進行滅活并加入白油佐劑制得D型產(chǎn)氣莢膜梭菌類毒素疫苗;再對制備的類毒素疫苗進行劑型檢查、無菌檢驗、安全檢驗、有效免疫劑量試驗和抗體消長規(guī)律試驗。
　　結(jié)果研究表明，D型產(chǎn)氣莢膜梭菌標準菌株外毒素用終濃度為0.3％甲醛96h即可完全滅活且其抗原性依然良好;對制備的D型產(chǎn)氣莢膜梭菌類毒素疫苗檢驗結(jié)果完全符合符合中華人

3、民共和國獸用生物制品質(zhì)量標準;攻毒保護實驗表明，對綿羊的有效免疫劑量為2ml/只，當(dāng)抗毒素抗體效價一級陽性（血清樣品抑制分數(shù)大于36.7％時）可有效地預(yù)防綿羊腸毒血癥的發(fā)生;用制備的類毒素疫苗接種綿羊后從第二周即產(chǎn)生抗毒素，抗體迅速升高，到第八周達到最高峰為三級陽性，之后抗體水平開始下降，但是24周時抗體依然在三級陽性程度的范圍內(nèi)，因為3-24周測得樣品抑制分數(shù)大于36.7％，且大部分時間毒素抗體處于三級陽性的范圍內(nèi)，所以該類毒素疫苗免