人腦挫傷后HSP70、bFGF和COX2免疫組織化學(xué)研究.pdf

1、目前,已有人分別應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)熱休克蛋白70(HSP70)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)和環(huán)氧合酶-2(COX2)在大鼠腦挫傷后的表達(dá)進(jìn)行了研究,結(jié)果表明這三項(xiàng)指標(biāo)的表達(dá)在傷后均呈現(xiàn)出一定的變化規(guī)律,但未見有人將HSP70、bFGF和COX2應(yīng)用于人腦挫傷時(shí)間推斷的研究.故該實(shí)驗(yàn)采用實(shí)際工作中的案例標(biāo)本,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色,旨在了解人腦挫傷后HSP70、bFGF和COX2的表達(dá),揭示其表達(dá)與人腦挫傷時(shí)間變化關(guān)系,同時(shí)觀察

2、尸體解剖標(biāo)本與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)標(biāo)本免疫組織化學(xué)的差別,為腦挫傷時(shí)間判定實(shí)際鑒定工作提供一條可行的理論依據(jù).實(shí)驗(yàn)材料與方法:1.實(shí)驗(yàn)分組.選擇1995-2001年因閉合性顱腦損傷死亡并伴有明顯大腦皮質(zhì)挫傷灶的35個(gè)案例,分成7個(gè)實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組選取非顱腦損傷且急性損傷致死5個(gè)案例,各組男女不限,年齡在19-58歲之間,平均年齡為38.09歲.2.免疫組織化學(xué)染色方法.石蠟切片常規(guī)脫蠟至少;3﹪H<,2>O<,2>滅活內(nèi)源性過氧化物酶;PBS沖洗;抗

3、原修復(fù);PBS沖洗;正常血清封閉;一抗,37℃1h,PBS沖洗;二抗,37℃30min;PBS沖洗;滴加SP(或SABC),37℃30min;PBS沖洗;DAB顯色后水洗;蘇木素復(fù)染,脫水、透明、封片.3.圖像分析與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.應(yīng)用MOTICAM 1300圖像分析儀,對(duì)免疫組織化學(xué)染色呈陽(yáng)性的細(xì)胞定量檢測(cè)其灰度值,然后在SPSS10.0for Window軟件下進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.結(jié)論:1.HSP70在人腦挫傷后0h表達(dá)量強(qiáng),傷后20-27