海參和海星腦苷脂抗腫瘤及改善癌癥惡病質(zhì)作用的研究.pdf

1、腦苷脂屬于鞘脂類，是生物細胞膜中廣泛存在的一類重要的活性脂質(zhì)，具有抗腫瘤、抗病毒、抗真菌、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等多種活性功能。腦苷脂是存在于海參和海星體壁中的主要活性成分。目前關于海參和海星腦苷脂抗腫瘤活性的報道很少且只停留在體外實驗水平。故本實驗從海參綱的海地瓜和海星綱的多棘海盤車中分別提取腦苷脂，在體外和體內(nèi)水平系統(tǒng)研究了海參和海星腦苷脂抗腫瘤活性和改善癌癥惡病質(zhì)作用及其作用機制，并對其構效關系進行了初步探討。主要研究結果如下：
　

2、　 本文首先采用MTT法對海參腦苷脂及其長鏈堿的體外抗腫瘤活性進行了篩選。實驗結果顯示，海參腦苷脂及其長鏈堿可抑制HepG2、S180、95D、Caco-2和HGC-27等多種腫瘤細胞的增殖活性，且有明顯的時間和劑量效應關系，表現(xiàn)出廣泛的抗腫瘤活性，其中長鏈堿的體外抗腫瘤活性顯著優(yōu)于海參腦苷脂。隨后，建立S180腹水瘤小鼠模型，并通過灌胃和腹腔注射兩種給藥方式在體內(nèi)水平驗證海參腦苷脂及其長鏈堿的抗腫瘤作用。結果發(fā)現(xiàn)，灌胃或腹腔注射長鏈

3、堿均可顯著延長S180腹水瘤小鼠的生存時間，表現(xiàn)出良好的體內(nèi)抗腫瘤作用。但海參腦苷脂只有通過灌胃方式才可表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤活性，且抗腫瘤效果與長鏈堿相當，推測該活性與腦苷脂在腸道中經(jīng)消化吸收后被分解為長鏈堿相關。該研究結果提示海參腦苷脂抗腫瘤作用的主要活性單元是其長鏈堿。
　　 為了進一步探究腦苷脂抗腫瘤活性的構效關系及其作用機制，本文又通過體外抗腫瘤實驗以及體內(nèi)建立S180肉瘤小鼠和腹水瘤小鼠兩個動物模型，觀察并比較了海參和海

4、星腦苷脂抗腫瘤作用效果并探究其作用機制。實驗結果發(fā)現(xiàn)，海參腦苷脂的體外抗腫瘤活性不如海星腦苷脂，但體內(nèi)抗腫瘤活性卻優(yōu)于海星腦苷脂，可能與兩種腦苷脂的脂肪酸和長鏈堿組成迥異以及經(jīng)體內(nèi)代謝后產(chǎn)物的活性差異相關。機制研究結果表明，海參和海星腦苷脂可通過誘導腫瘤細胞凋亡抑制腫瘤細胞的增殖活性，并能通過提高機體的免疫功能和抗氧化能力以及通過線粒體信號通路啟動腫瘤細胞凋亡等途徑抑制肉瘤的生長、腹水量及腹水瘤細胞的存活并延長腹水小鼠生存時間。

5、　　 癌癥惡病質(zhì)是惡性腫瘤病患中常見的多因素導致的浪費型代謝綜合癥，主要表現(xiàn)為極度消瘦，體內(nèi)脂肪和肌肉組織大量分解，是導致癌癥病患生活質(zhì)量嚴重降低和高死亡率的主要原因之一。故本文利用S180腹水瘤小鼠模擬癌癥惡病質(zhì)模型，比較研究了海參和海星腦苷脂改善癌癥惡病質(zhì)作用，并在細胞因子和分子水平上闡明其作用機制。實驗結果發(fā)現(xiàn)，海參和海星腦苷脂均表現(xiàn)出良好的改善癌癥惡病質(zhì)功效，均可顯著延緩癌癥惡病質(zhì)小鼠體重下降，抑制脂肪和肌肉組織分解。對其機制

6、研究表明，海參和海星腦苷脂可通過以下幾條途徑改善癌癥惡病質(zhì)：可以抑制促惡病質(zhì)細胞因子TNF-α、IL-1和IL-6的分泌；可以抑制脂肪組織脂肪分解酶ATGL和HSL及脂肪動員因子ZAG的表達，抑制脂解：可以促進脂肪細胞分化、葡萄糖和脂肪酸轉運及攝取，上調(diào)脂肪組織中SREBP-1c調(diào)控的脂肪合成基因的表達，促進脂肪合成；還可以抑制脂肪利用相關基因UCP2和PGC-1α的mRNA表達。
　　 有研究報道，海星磷脂富含EPA和DHA等

7、多不飽和脂肪酸，且表現(xiàn)出良好的抗腫瘤活性。最后，本文從多棘海盤車中提取磷脂并與海星腦苷脂復配，比較研究了海星腦苷脂及其磷脂復配后與腦苷脂、磷脂單獨使用時體外和體內(nèi)抗腫瘤活性的差異。實驗結果表明，海星腦苷脂及其磷脂復配后抗腫瘤活性要顯著優(yōu)于海星腦苷脂、磷脂單獨使用。
　　 本文首次系統(tǒng)研究了海參和海星腦苷脂抗腫瘤和改善癌癥惡病質(zhì)的活性，并對其結構和活性差異進行了比較，初步闡明了其作用機制。同時首次發(fā)現(xiàn)海星腦苷脂及其磷脂復配使用時表