查爾酮合酶基因RNAi表達載體構(gòu)建及矮牽牛遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 本文利用短干涉RNA(siRNA)進行了矮牽牛查爾酮合成酶(CHS)基因短干涉RNA片段表達載體的構(gòu)建，研究了矮牽牛再生體系和基因槍介導、農(nóng)桿菌介導遺傳轉(zhuǎn)化體系，并進行矮牽牛CHS基因的RNAi載體轉(zhuǎn)化研究。得到如下結(jié)果： 1.構(gòu)建了兩個抑制矮牽牛查爾酮合成酶(CHS)基因表達的RNAi表達載體pBI121-CHS。 2.建立了成熟的矮牽牛再生體系。通過正交試驗，研究了不同激素水平下對矮牽牛再生體系的誘導效應(yīng)，確

2、定誘導愈傷組織的最適宜培養(yǎng)基。通過矮牽牛對照株對不同濃度Kan的敏感性試驗，得出適宜的篩選濃度為80mg/L。利用此濃度，可對轉(zhuǎn)化后矮牽牛植株進行抗性篩選。 4.初步建立了基因槍介導的轉(zhuǎn)基因體系。研究了不同轟擊距離和次數(shù)對轉(zhuǎn)化效果的影響，確定了適宜的基因槍轟擊參數(shù)為轟擊距離。 5.初步建立農(nóng)桿菌葉盤法介導轉(zhuǎn)基因體系。研究了不同農(nóng)桿菌菌液濃度和侵染時間對矮牽牛無菌苗葉盤分化率的影響，確定適宜的菌液感染濃度OD600=0.5

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