氟甲砜霉素體外藥效及在斑點(diǎn)叉尾鮰體內(nèi)藥動學(xué)與殘留研究.pdf

1、本文研究了氟甲砜霉素對水產(chǎn)致病菌的體外抑菌作用，氟甲砜霉素及其它藥物對水產(chǎn)致病菌的藥敏試驗(yàn)，水產(chǎn)致病菌對氟甲砜霉素的耐藥性；研究了氟甲砜霉素對斑點(diǎn)叉尾鲴的急性毒性；建立了測定魚肌肉中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素殘留量的電子捕獲氣相色譜(GC-ECD)法；建立了斑點(diǎn)叉尾鲴(Ictalurus punctatus)體內(nèi)各組織中氟甲砜霉素及其代謝物氟甲砜霉素胺同時檢測的高效液相色譜紫外檢測法。建立了斑點(diǎn)叉尾鲴(Ictalurus puncta

2、tus)肌肉中氟甲砜霉素及其代謝物氟甲砜霉素胺同時檢測的高效液相色譜熒光檢測法；研究了兩種水溫下氟甲砜霉素在斑點(diǎn)叉尾鲴體內(nèi)的藥代動力學(xué)及殘留消除規(guī)律。 1.研究了氟甲砜霉素對7種水產(chǎn)致病菌的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)，氟甲砜霉素及其他24種對照抗菌藥物對7種水產(chǎn)致病菌的藥敏試驗(yàn)及7種水產(chǎn)致病菌對氟甲砜霉素的耐藥性。結(jié)果表明，氟甲砜霉素對水產(chǎn)致病菌有較好的抑菌效果，測試的7種菌中有5種菌對氟甲砜霉素高度敏感，1

3、種菌中度敏感，1種菌產(chǎn)生耐藥性。供試菌對氟甲砜霉素的耐藥性獲得速率也較慢。 2.研究了氟甲砜霉素以單次口灌對斑點(diǎn)又尾鲴(Ictalurus punctatus)的急性毒性。按1、2、3、4、5g/kg體重劑量口灌斑點(diǎn)叉尾鲴，96h觀察斑點(diǎn)叉尾鲴各組均未死亡，再連續(xù)觀察72h，各試驗(yàn)組魚仍然無不良反應(yīng)，活體剖解，內(nèi)臟各器官無明顯中毒癥狀，氟甲砜霉素對斑點(diǎn)叉尾鲴的LD<,50>>5000mg/kg。結(jié)果顯示，氟甲砜霉素對斑點(diǎn)叉尾鲴的

4、毒性低。 3.研究并建立了測定魚肌肉中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素殘留量的電子捕獲氣相色譜(GC-ECD)法。本方法氯霉素在1.0～500.0μg/L，氟甲砜霉素和甲砜霉素在5.0-500.0μg/L濃度范圍內(nèi)呈線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r≥0.9983，加標(biāo)水平在0.2～10.0μg/kg時，回收率為83.30％～101.22％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.36％～12.57％。氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素的檢測限分別為0.1、0.2、0.2μ

5、g/kg。該方法適用于水產(chǎn)品中氯霉素、氟甲砜霉素、甲砜霉素殘留量的同時檢測。 4.建立了斑點(diǎn)叉尾鲴(Ictalurus punctatus)體內(nèi)各組織中氟甲砜霉素及其代謝物氟甲砜霉素胺的高效液相色譜紫外檢測法。本方法氟甲砜霉素和氟甲砜霉素胺在0.01～10.00mg/L濃度范圍內(nèi)呈線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)均為r=0.9997。氟甲砜霉素的平均回收率為75.14％～92.65％，氟甲砜霉素胺的平均回收率為76.00％～91.50％，相對

6、標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.41％～9.30％，氟甲砜霉素和氟甲砜霉素胺在血漿、肌肉、皮膚、肝臟、腎臟中的檢測限分別為25、2μg/L，20、15μg/kg，50、50μg/kg，50、50μg/kg，50、50μg/kg。該方法適用于氟甲砜霉素在魚體內(nèi)藥代動力學(xué)研究和氟甲砜霉素及其代謝物氟甲砜霉素胺在魚體各組織中殘留量的同時測定。 5.建立了斑點(diǎn)叉尾鲴肌肉中氟甲砜霉素和氟甲砜霉素胺同時檢測的高效液相色譜熒光檢測法。本方法氟甲砜霉素在10～1

7、0000ng/mL，氟甲砜霉素胺在2～2000ng/mL濃度范圍內(nèi)呈線性相，相關(guān)系數(shù)分別為r=1，r=0.9999。當(dāng)空白樣品中氟甲砜霉素添加水平為20～20μg/kg，氟甲砜霉素胺添加水平為4～50μg/kg時，該方法的回收率為79.26％～90.63％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.66％～6.21％，最低檢測限分別為5μg/kg和1μg/kg。結(jié)果表明：該方法具有靈敏度高，操作簡便，準(zhǔn)確，快速。適用于同時檢測水產(chǎn)品中氟甲砜霉素和氟甲砜霉素胺的

8、殘留量。 6.研究不同水溫(18℃和28℃)下，按10mg/kg魚體重的劑量強(qiáng)飼氟甲砜霉素，在斑點(diǎn)叉尾鲴體內(nèi)藥代動力學(xué)特征及殘留消除規(guī)律。采用高效液相色譜紫外檢測法檢測斑點(diǎn)叉鮰血漿中氟甲砜霉素和各組織中氟甲砜霉素及其代謝物氟甲砜霉素胺的濃度。用3p97進(jìn)行藥動學(xué)數(shù)據(jù)分析。結(jié)果表明，在不同水溫下氟甲砜霉素在斑點(diǎn)叉尾鮰體內(nèi)的藥時數(shù)據(jù)均符合一室開放式模型。18℃和28℃動力學(xué)方程分別為：c 血漿=7.92(e<'-0.036t> -e

9、<'-0.18t>)和C<,血漿>=9.06(e<'-0.08t>-e<-0.30t>)。結(jié)果顯示：水溫升高，氟甲砜霉素在斑點(diǎn)叉尾鲴血漿中吸收、分布和消除明顯加快。28℃下T<,1/2ka>。18℃的3/5，T<,1/2tke)>、MRT、AUC僅為18℃的1/2，但相對表觀分布容積V/F<,(c)與18℃時比較接近。以10mg/kg體重的劑量連續(xù)強(qiáng)飼3d后，于1，2，3，5，7，9d檢測斑點(diǎn)叉尾鮰肌肉、皮膚、肝臟、腎臟組織中氟甲砜霉素

10、及其代謝物氟甲砜霉素胺。以氟甲砜霉素和氟甲砜霉素胺濃度的和作為標(biāo)示殘留物。結(jié)果顯示：高水溫時標(biāo)示殘留物(總量)在斑點(diǎn)叉尾鲴體內(nèi)消除的更快。與其它組織相比標(biāo)示殘留物(總量)在腎臟中的消除最慢，腎臟為標(biāo)示殘留物(總量)在斑點(diǎn)叉尾鮰體內(nèi)殘留的靶組織。在18℃和28℃時，標(biāo)示殘留物(總量)在腎臟中以300μg/kg為最高殘留限量(maximum residuelimit，MRL)建議休藥期分別為13d和8d。本研究為不同水溫條件下制定合理的給藥