

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、油葵(Helianthus annuus L.)是我國五大油料作物之一,具有耐寒耐旱,耐鹽堿耐瘠薄,適應(yīng)性廣,對土壤要求不高等特性。早在本世紀50年代,品質(zhì)遺傳學(xué)家就有報道稱,油菜籽中蛋白質(zhì)的含量與油脂含量呈高度的負相關(guān)關(guān)系,在其中起重要作用的關(guān)鍵酶則是磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)?,F(xiàn)在在油菜和大豆上已經(jīng)有PEPC敲除實例,其對產(chǎn)油量確實產(chǎn)生了一定的促進作用。
鑒于油葵PEPC基因未知,本研究根據(jù)親緣較近物種的PEP
2、C基因同源克隆了油葵PEPC基因mRNA的部分序列,同源比對找到兩個進化保守區(qū),構(gòu)建RNAi表達載體,以期能夠提高油葵的含油量。本研究得到實驗結(jié)果如下:
(1)用同源克隆的方法得到了油葵PEPC基因以及mRNA的部分序列。由于油葵中對該基因的研究還沒有報道,因此需要以此序列再到GENEBANK中進行比對。比對結(jié)果顯示,所擴增片段與GENEBANK中其他物種PEPC序列同源性極高,尤其是與油葵同科植物黃花菊屬和青蒿的同源性為
3、最高,與黃花菊屬中不同植物的PEPC基因相似度達到92%以上,說明所得序列可以判斷為油葵PEPC基因部分序列。
(2)在油葵PEPC基因中通過比對找到兩個保守區(qū),根據(jù)RNAi要求dsRNA的大小,以及pTCK-303載體中的酶切位點,設(shè)計引物,克隆這兩個片段,并連入了T載體測序無誤。分別正反向連入載體pTCK-303,成功構(gòu)建油葵PEPC基因的RNAi載體pTCK303-FP1-RP1和pTCK303-FP2-RP2。
4、r> (3)通過比較,確定油葵的組織培養(yǎng)植株再生的最佳外植體為莖尖周緣分生區(qū)。其愈傷誘導(dǎo)率和不定芽的誘導(dǎo)率都高于其他外植體。最佳不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+IAA(0.03 mg·L-1)+6-BA(1.4~1.6 mg·L-1),誘導(dǎo)率可達76.67%。在培養(yǎng)基1/2MS+NAA(0.3 mg·L-1)上進行生根培養(yǎng),所有不定芽均可生根,且須根較多,利于組培苗的移栽成活。經(jīng)過油葵花粉管通道法轉(zhuǎn)化的探索,確定其可以得到陽性種子,為下一
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 甘藍型油菜PEPC基因保守序列的克隆和種子特異性ihpRNA表達載體的構(gòu)建.pdf
- 花生MADS-box基因保守序列的克隆與分析.pdf
- 砂梨果實成熟相關(guān)基因的克隆及其RNAi載體的構(gòu)建.pdf
- 45389.蜘蛛組蛋白h3基因保守序列的克隆與進化分析
- 白樺OSC新基因的克隆、RNAi載體構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化初步研究.pdf
- 木薯淀粉分支酶基因sbei的克隆、表達分析及RNAi載體構(gòu)建.pdf
- 脊椎動物基因組的超級保守序列及剪接位點分析.pdf
- 蒙古冰草抗旱相關(guān)基因克隆、表達及RNAi載體構(gòu)建.pdf
- 杜氏鹽藻PEPC基因的克隆與油菜DGAT基因微藻表達載體的構(gòu)建.pdf
- 菊花與青蒿MET1基因克隆及菊花RNAi載體構(gòu)建.pdf
- 56806.bnyvvcp基因cdna的克隆、序列測定及轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建
- 蓖麻磷脂酶C基因的克隆及其RNAi表達載體的構(gòu)建.pdf
- 藍藻hox1基因和pcyA基因的克隆、序列分析及表達載體的構(gòu)建.pdf
- 36663.蜘蛛組蛋白h3保守序列的克隆和系統(tǒng)進化
- gdnf基因克隆及表達載體的構(gòu)建
- 山羊卵泡刺激素基因的克隆、序列分析及表達載體構(gòu)建.pdf
- 砂梨果實乙烯受體基因的克隆、表達調(diào)控及其RNAi載體的構(gòu)建.pdf
- 褐飛虱精氨酸激酶基因的克隆及其RNAi載體的構(gòu)建和轉(zhuǎn)化.pdf
- 含結(jié)核特異CDR3保守序列TCR基因的構(gòu)建及其修飾T細胞抗結(jié)核活性研究.pdf
- 小麥籽粒硬度基因RNAi表達載體構(gòu)建.pdf
評論
0/150
提交評論