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文檔簡(jiǎn)介
1、香菇(Lentinulaedodes)子實(shí)體的形成是香菇整個(gè)生活史中最復(fù)雜也是最重要的發(fā)育過(guò)程,需要環(huán)境、遺傳、生理等多個(gè)因素相互作用。研究子實(shí)體發(fā)育相關(guān)基因一直是食用菌領(lǐng)域中個(gè)重要的研究?jī)?nèi)容。正常的香菇子實(shí)體分化形成菌蓋、菌褶和菌柄。
香菇球形子實(shí)體是在湖北省隨縣三里崗鎮(zhèn)發(fā)現(xiàn)的香菇正常子實(shí)體中的變異類(lèi)型,整個(gè)子實(shí)體成球形,菌蓋不開(kāi)傘,菌柄不伸長(zhǎng),菌褶未見(jiàn)分化。經(jīng)過(guò)組織分離獲得純培養(yǎng)菌種,進(jìn)行再次栽培試驗(yàn),仍然長(zhǎng)出球形子實(shí)
2、體。本試驗(yàn)以子實(shí)體為球形的香菇菌株為材料,利用DDRT-PCR技術(shù)克隆及分析了該菌株在菌絲、原基、子實(shí)體三個(gè)階段基因。試驗(yàn)采用3條錨定引物和26條隨機(jī)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,其中只有14條隨機(jī)引物可以擴(kuò)增出重復(fù)性好、數(shù)量多且清晰地條帶,擴(kuò)增結(jié)果以PA和Pc為錨定引物反轉(zhuǎn)錄獲得的cDNA模板最好。得到穩(wěn)定的差異條帶41條,經(jīng)過(guò)反向Northern點(diǎn)雜交驗(yàn)證出陽(yáng)性差異片段17條,假陽(yáng)性率為58.54%??寺y(cè)序后在Genbank數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行BL
3、AST同源分析,17條差異片段中有7條片段與已知的基因序列和蛋白序列具有較高的相似性。
差異片段GP20-540與香菇LephrA基因AB279630.1具有98%的相似性,推測(cè)其可能是編碼藍(lán)光受體A的基因,參與類(lèi)胡蘿卜素的生成、生物鐘的重設(shè)等功能;差異片段APlo-302編碼的蛋白與泉古菌(unculturedcrenarchaeote)45-H-12歸位內(nèi)切酶I-ApelI具有38%的相似性,推測(cè)其可能和蛋白質(zhì)剪接相關(guān)
4、;差異片段CP16-324編碼的蛋白與土曲霉(Aspergillusterreus)天冬氨酸激酶具有43%的相似性,推測(cè)其可能編碼天冬氨酸激酶,參與賴氨酸的生物合成;差異片段CP18-394編碼的蛋白與煙曲霉(Aspergillusfumigatus)的熱激蛋白90輔助分子伴侶序列具有41%的相似性,推測(cè)其具有抗逆以及作為分子伴侶維持蛋白穩(wěn)定和激酶活性;差異片段GP7-502編碼的蛋白與雙色蠟?zāi)?Laccariabicolor)的糖苷水
5、解酶家族2蛋白具有50%的相似性,推測(cè)其可能和糖代謝有關(guān);差異片段CP20-321編碼的蛋白與靈芝(Ganodermalucidum)的金屬硫蛋白具有54%的相似性,推測(cè)其可能在重金屬解毒、金屬離子運(yùn)輸及動(dòng)態(tài)平衡的維持、離子代謝以及活性氧的清除等方面起作用;差異片段AP2l-479編碼的蛋白與灰蓋鬼傘(Coprinopsiscinerea)的假定蛋白CClG-_01848具有60%的相似性,但該蛋白的具體功能有待研究。進(jìn)一步比較香菇正常
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