原生質(zhì)體融合創(chuàng)造柑橘新材料及其遺傳分析.pdf

1、該研究旨在根據(jù)中國柑橘品種的遺傳改良實際,有針對性地選配親本組合,通過電場誘導開展柑橘原生質(zhì)體的對稱和非對稱融合,以期將細胞質(zhì)雄性不育基因轉(zhuǎn)移到有籽品種中,也為柑橘砧土改良和培育三倍體接穗品種提供可供選擇的材料.主要研究結(jié)果如下:1 從建立胚性懸浮系入手,建立起國慶1號(Citrus unshiu 'Guoqing No.1')、國慶5號(C.unshiu'Guoqing No.5')等溫州蜜柑品種原生質(zhì)體培養(yǎng)的胚狀體高頻再生體系.2

2、針對中國柑橘砧土改良,對稱融合獲得了枸頭橙(C.aurantium 'Goutou sour orange')+枳殼(Poncirus trifoliata 'trifoliate orange')組合的再生植株,獲得了三種類型共30余株植株,經(jīng)形態(tài)學、細胞學、SSR鑒定均為四倍體體細胞雜種.3 對稱融合獲得了紐荷爾臍橙(C. sinesis 'Newhall navel orange')與黃皮(Clausena lansium'Chi

3、cken heart sweet wampee')屬間三倍體、四倍體植株.4 開展了轉(zhuǎn)移溫洲蜜柑CMS性狀到有籽品種的研究.5 該研究對柑桔亞原生質(zhì)的分離進行了嘗試.結(jié)果表明,柑橘原生質(zhì)體的直徑為20-30μm,采用蔗糖梯度超速離心分離亞原生質(zhì)體,其適宜離心力是100,000-140,000g;利用DAPI染色效果最好,可明顯區(qū)分開細胞核和細胞質(zhì);愈傷組織經(jīng)CB處理36h后再分離亞原生質(zhì)體,可顯著提高核質(zhì)體的產(chǎn)量,分離的核質(zhì)體直徑為1.