原生質(zhì)體融合創(chuàng)造柑橘新材料及其遺傳分析.pdf

1、該研究旨在根據(jù)中國(guó)柑橘品種的遺傳改良實(shí)際,有針對(duì)性地選配親本組合,通過(guò)電場(chǎng)誘導(dǎo)開(kāi)展柑橘原生質(zhì)體的對(duì)稱(chēng)和非對(duì)稱(chēng)融合,以期將細(xì)胞質(zhì)雄性不育基因轉(zhuǎn)移到有籽品種中,也為柑橘砧土改良和培育三倍體接穗品種提供可供選擇的材料.主要研究結(jié)果如下:1 從建立胚性懸浮系入手,建立起國(guó)慶1號(hào)(Citrus unshiu 'Guoqing No.1')、國(guó)慶5號(hào)(C.unshiu'Guoqing No.5')等溫州蜜柑品種原生質(zhì)體培養(yǎng)的胚狀體高頻再生體系.2

2、針對(duì)中國(guó)柑橘砧土改良,對(duì)稱(chēng)融合獲得了枸頭橙(C.aurantium 'Goutou sour orange')+枳殼(Poncirus trifoliata 'trifoliate orange')組合的再生植株,獲得了三種類(lèi)型共30余株植株,經(jīng)形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)、SSR鑒定均為四倍體體細(xì)胞雜種.3 對(duì)稱(chēng)融合獲得了紐荷爾臍橙(C. sinesis 'Newhall navel orange')與黃皮(Clausena lansium'Chi

3、cken heart sweet wampee')屬間三倍體、四倍體植株.4 開(kāi)展了轉(zhuǎn)移溫洲蜜柑CMS性狀到有籽品種的研究.5 該研究對(duì)柑桔亞原生質(zhì)的分離進(jìn)行了嘗試.結(jié)果表明,柑橘原生質(zhì)體的直徑為20-30μm,采用蔗糖梯度超速離心分離亞原生質(zhì)體,其適宜離心力是100,000-140,000g;利用DAPI染色效果最好,可明顯區(qū)分開(kāi)細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì);愈傷組織經(jīng)CB處理36h后再分離亞原生質(zhì)體,可顯著提高核質(zhì)體的產(chǎn)量,分離的核質(zhì)體直徑為1.