煙草天蛾新細(xì)胞系生長特性及重組蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、昆蟲細(xì)胞作為生物農(nóng)藥和基因表達(dá)的新型生物反應(yīng)器而備受青睞。因此，不斷發(fā)掘新細(xì)胞系，為科學(xué)研究和生產(chǎn)提供新資源，是目前研究的熱點(diǎn)。
　　 本研究以煙草天蛾（Manduca sexta）受精卵為材料，建立多株煙草天蛾胚胎細(xì)胞系，從中篩選了三株生長狀況較好的細(xì)胞系，分別命名為QB-Ms1-8，QB-Ms2-2，QB-Ms2-7。并對其生物學(xué)特性進(jìn)行研究，主要結(jié)果如下:
　　 1.QB-Ms1-8，QB-Ms2-2，QB-Ms2

2、-7三株細(xì)胞在輔以10％胎牛血清的TNM-FH培養(yǎng)基中28℃條件下傳代培養(yǎng)50代以上，性狀穩(wěn)定，細(xì)胞以棱形為主，有少量圓形。
　　 2.對QB-Ms1-8，QB-Ms2-2，QB-Ms2-7三株細(xì)胞與煙草天蛾卵的基因組DNA進(jìn)行RAPD-PCR鑒定，結(jié)果表明各細(xì)胞株與煙草天蛾卵具有相同的DNA擴(kuò)增譜帶。
　　 3.測定了QB-Ms1-8，QB-Ms2-2，QB-Ms2-7三株細(xì)胞的生長曲線和群體倍增時(shí)間，QB-Ms2-2

3、細(xì)胞在生長第6d達(dá)到最大值，達(dá)到1×106cells/mL，QB-Ms1-8，QB-Ms2-2，QB-Ms2-7三株細(xì)胞的群體倍增時(shí)間分別為61，37，46h。
　　 4.病毒侵染試驗(yàn)表明，QB-Ms1-8，QB-Ms2-2，QB-Ms2-7三株細(xì)胞對AcMNPV不敏感，感染率分別為33％、40％、36％，平均每個(gè)細(xì)胞病毒多角體(OBs)產(chǎn)量非常低。
　　 5.重組蛋白表達(dá)水平測定表明，QB-Ms1-8，QB-Ms2-2