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1、DTAB的合成及其與DNA作用的研究一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解表面活性劑,特別是陽離子表面活性劑的主要性質(zhì)和用途;2.掌握十二烷基三甲基溴化銨(DTAB)的合成原理和方法;3.測(cè)定DTAB的CMC值,并掌握電導(dǎo)法測(cè)定離子型表面活性劑的CMC的方法;4.學(xué)會(huì)分析DTABDNA混合溶液的透射光譜。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理表面活性劑是一種有雙親結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物,至少含有兩種極性、親液性迥然不同的基團(tuán)部分。它能使表面張力顯著下降,改變體系
2、界面狀態(tài),從而產(chǎn)生潤(rùn)濕、乳化、起泡以及增溶等一系列作用,可用來改進(jìn)工藝、提高質(zhì)量,增產(chǎn)節(jié)約收效顯著,有“工業(yè)味精”之美稱,廣泛應(yīng)用于洗滌劑、紡織、皮革、造紙、塑料、選礦、食品、化工、建筑、化妝品、農(nóng)藥等行業(yè)。陽離子表面活性劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)中至少含有一個(gè)長(zhǎng)鏈親油基和一個(gè)帶正電荷的親水基。正電荷一般都是有氮原子攜帶,也可由硫原子及磷原子攜帶,脂肪胺與季銨鹽是主要的陽離子表面活性劑,他們的氨基與季銨基帶有正電荷具有抗靜電。乳化、潤(rùn)濕等主要性能。由
3、于陽離子表面活性劑和基質(zhì)間具有強(qiáng)烈形成的靜電引力,親油基朝向水相,使基質(zhì)疏水,因此不適用于洗滌。但當(dāng)其吸附在纖維表面形成一定向吸附膜后,中和了纖維表面帶有的電荷,減少了因摩擦產(chǎn)生的自由電子,因而具有較好的抗靜電性能。此外,陽離子表面活性劑的殺菌作用是很顯著的,常用于外科消毒、傷口洗滌和餐具消毒等方面。陽離子表面活性劑的主要類型有胺鹽型和季銨鹽型,本實(shí)驗(yàn)合成的目標(biāo)產(chǎn)物就是季銨鹽陽離子表面活性劑。季銨鹽是陽離子表面活性劑中最重要的一類,在工
4、業(yè)上有著重要的應(yīng)用價(jià)值。常用的議案眼合成方法有兩種:(1)從伯、仲、叔胺制取季銨鹽;(2)低級(jí)叔胺與鹵代烷反應(yīng)制取季銨鹽。本實(shí)驗(yàn)中DTAB采用第二種方法合成。其反應(yīng)方程式為:CH3NH3CCH3CH3NCH3CH3BrBr甲醇這是一個(gè)鹵代烴的親核取代反應(yīng),它是從無電荷的反應(yīng)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛蟹稚㈦姾傻倪^渡狀態(tài),最后形成離子型表面活性劑的過程。副反應(yīng)主要有脫HBr的消除反應(yīng),及較高溫度下的氧化反應(yīng)等。在表面活性劑溶液中,當(dāng)溶液濃度增大到一定值時(shí),
5、表面活性離子或分子將會(huì)發(fā)生締合,形成膠束。表面活性劑溶液開始形成膠束的最小濃度稱為該表面活性劑的臨界膠束濃度(criticalmicelleconcentration,CMC)。表面活性劑的許多物理化學(xué)性質(zhì)隨著膠束的行成而發(fā)生突變。表面活性劑溶液只有在濃度高于CMC時(shí)才能充分發(fā)揮其作用(如潤(rùn)濕作以DTAB溶液的電導(dǎo)率?為縱坐標(biāo),濃度c為橫坐標(biāo)作圖,кc曲線的轉(zhuǎn)折點(diǎn)對(duì)應(yīng)的濃度即為25℃時(shí)DTAB的臨界膠束濃度。表1CMC值測(cè)定計(jì)劃表濃度m
6、olL1實(shí)際體積mL實(shí)際濃度molL1加水量mL0.006860.006047210.008650.008000130.01520.01000090.012430.0120960.014370.014054.50.01632.50.016003.50.018290.0179330.02260.020002.40.02223.60.0220320.02421.60.024071.60.026200.0260003紫外可見分光光度法研究DT
7、AB與DNA的相互作用(1)根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件,將UV757CRT型儀器按操作步驟進(jìn)行調(diào)節(jié),若儀器狀態(tài)正常,即可測(cè)定各試液的紫外吸收光譜。(2)參數(shù)設(shè)置波長(zhǎng)掃描范圍是230~400nm,別的參數(shù)不用改變。(3)以溶劑為參比進(jìn)行“基線校準(zhǔn)”,校準(zhǔn)完畢后點(diǎn)擊“開始掃描”,掃描曲線應(yīng)是吸光度約為零的一條平坦的直線。(4)以從低濃度到高濃度的順序換上待溶液a,測(cè)繪各溶液在230~500nm的吸收光譜。每次掃描完成后,從“圖譜處理”下拉菜單中選擇“傳送
8、數(shù)據(jù)到Excel”保存數(shù)據(jù)。a待測(cè)液:向1.0104molLDNA鹽溶液中滴加DTAB鹽溶液(溶劑均為0.01molLNaBr溶液),具體滴加量參見表2。表2在450nm時(shí)DTABDNA混合溶液的透射率理想濃度molL1加入G總體積μL實(shí)際濃度molL1濃度對(duì)數(shù)備注0.0072100.0065422.1840.0051500.0047622.3220.0041200.0038462.4150.003900.0029132.5360.00
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