顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖中二氫楊梅素制備工藝研究.pdf

1、顯齒蛇葡萄是我國(guó)重要的類茶植物，藤茶為其主要加工產(chǎn)品，其加工過程中會(huì)產(chǎn)生大量的廢棄莖。武陵山區(qū)每年藤茶產(chǎn)量約為10000噸，產(chǎn)生的廢棄莖約為600噸。DMY是一種食品、藥品添加劑和醫(yī)藥中間體，為顯齒蛇葡萄的重要活性成分。目前高純度的DMY主要從較貴的顯齒蛇葡萄葉中提取，價(jià)格昂貴。因此如何利用顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖這一丟棄資源提取DMY，提高顯齒蛇葡萄種植和加工的經(jīng)濟(jì)效益，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本文對(duì)從顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖中提取、分離高純度D

2、MY進(jìn)行了較深入全面的研究，結(jié)果如下：
　?。?）建立了DMY的高效液相色譜檢測(cè)方法和總黃酮的雙波長(zhǎng)分光光度檢測(cè)方法，對(duì)顯齒蛇葡萄不同部位DMY和總黃酮含量進(jìn)行了測(cè)定。HPLC測(cè)定條件為：色譜柱系Kromasil C18，乙腈:0.05％磷酸（18:82）為流動(dòng)相，流速為1.0 mL/min，柱溫為27.8℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為292 nm；得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：C=0.000019S-2.726383， R2=0.9998，C∈(20.3，

3、203μg/mL)。雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定條件為：310 nm為測(cè)定波長(zhǎng)，340 nm為參比波長(zhǎng)， AlCl3為顯色劑；得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：C=18.509ΔA-0.19679，R2=0.9998，C∈(4，24μg/mL)。各部位總黃酮和DMY測(cè)定結(jié)果為：總黃酮和DMY含量最高的部位為嫩葉，其含量分別為15.01%、7.79%；DMY占總黃酮比例最高的部位為嫩莖，比例為64.31%；藤茶地上部位總黃酮和DMY含量均大于地下部位。
　

4、　（2）系統(tǒng)研究了酶法提取顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖中 DMY的工藝。得提取DMY最優(yōu)工藝參數(shù)為：酶類型為復(fù)合酶、溶液pH=4.46、酶解溫度45℃、酶添加量2.0%、料液比為1:20。在此條件下，DMY提取率為30.65%，純度為23.40%。并與傳統(tǒng)提取方法和超聲波輔助提取法進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果酶法提取效果最佳。
　?。?）研究了活性炭分離DMY的工藝。在單因素基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面優(yōu)化出ZX-1號(hào)活性炭分離DMY的最佳工藝條件為：pH=2.

5、09，溫度50.51℃，活性炭用量為19.80%。在此條件下，DMY的收率為96.99%，純度由23.40%提高到33.29%。
　?。?）確定了DMY的溶劑萃取工藝條件。其優(yōu)化條件為：萃取試劑為乙酸乙酯，萃取時(shí)間8.52 min，萃取溫度59.26℃，料液比0.013 g/mL。在此條件下，DMY的收率為86.01%，純度由33.29%提高到66.01%。
　　（5）系統(tǒng)研究了DMY的結(jié)晶工藝。采用乙醇濃度梯度對(duì)DMY進(jìn)行

6、結(jié)晶，通過正交實(shí)驗(yàn)得出最佳工藝條件為：養(yǎng)晶時(shí)間96 h，養(yǎng)晶溫度為7℃，結(jié)晶試劑乙醇濃度為16.67%。在此條件下，進(jìn)行3次結(jié)晶后，DMY收率為79%，純度可以達(dá)到98%以上。
　?。?）采用UV、HPLC、IR、1H-NMR、13C-NMR對(duì)98%DMY進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。結(jié)果顯示：從顯齒蛇葡萄制茶廢棄莖中提取的 DMY樣品和對(duì)照品的吸收光譜一致，HPLC的出峰時(shí)間相同，IR的光譜圖一致，1H-NMR、13C-NMR化學(xué)位移相同；說明