基于核酸側(cè)向?qū)游龅膍icroRNA快速檢測新方法建立.pdf

1、隨著人們生活節(jié)奏的加快和飲食結(jié)構(gòu)的變化，罹患癌癥的人群增多，對癌癥的前期診斷和術(shù)后的監(jiān)控尤為重要。而MicroRNA的表達水平和癌癥的發(fā)生緊密相連。此外，microRNA可通過日常食物攝取進入人體內(nèi)，從而調(diào)控人體靶基因表達方式，進而影響人體的生理功能。MicroRNA種類繁多，因此建立microRNA的快速、簡單、高靈敏的多重檢測技術(shù)在醫(yī)學(xué)、食品營養(yǎng)與安全等領(lǐng)域具有重要意義。本文建立了以下兩種檢測方法:
　　(1)基于側(cè)向?qū)游龊怂?/p>

2、試紙條多重檢測microRNA
　　本方法利用三組Au-SH probe-T probe“三明治”夾心結(jié)構(gòu)的形成實現(xiàn)對microRNA的三重檢測。在金納米粒子表面固定檢測探針SH probe，NC膜上固定捕獲探針T probe，目標物microRNA可與SH probe和T Probe部分雜交，形成夾心結(jié)構(gòu)從而將金納米粒子捕獲并滯留在NC膜上，通過金納米粒子在檢測線上的累積從而出現(xiàn)肉眼可見的條帶。建立的單重核酸試紙條對microR

3、NA-21，microRNA-155和microRNA-210肉眼檢測限分別為1nM，5nM和5 nM;建立的多重核酸試紙條可以很好地實現(xiàn)對三種目標物的同時檢測且不發(fā)生交叉反應(yīng)。
　　(2)基于側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)的表面增強拉曼光譜雙重檢測microRNA
　　本方法是建立在Au@Ag-SH probe-T probe夾心結(jié)構(gòu)形成的基礎(chǔ)上，在Au@Ag上固定檢測探針之前先在其表面修飾拉曼信號分子。當(dāng)修飾了拉曼信號分子的Au@Ag被滯