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
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文檔簡介
1、泡菜是我國傳統(tǒng)的發(fā)酵蔬菜制品,一直以其獨(dú)特的風(fēng)味和營養(yǎng)價值廣受消費(fèi)者歡迎。人工接種乳酸菌發(fā)酵泡菜不僅能顯著改善傳統(tǒng)自然發(fā)酵周期長、質(zhì)量不穩(wěn)定和食用安全性差等問題,而且有利于降低成本,便于工業(yè)化、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)?;纳a(chǎn)和控制。本研究旨在篩選優(yōu)良菌株應(yīng)用于純種發(fā)酵泡菜,研究乳酸菌對泡菜質(zhì)構(gòu)和風(fēng)味的影響,優(yōu)化發(fā)酵工藝,在減少發(fā)酵時間的同時提高產(chǎn)品質(zhì)量和風(fēng)味。主要研究結(jié)果如下:
(1)本文從老壇酸菜、貴州酸湯和泡青菜中分離乳酸菌,從中篩
2、選出產(chǎn)酸、耐酸、耐鹽及降解亞硝酸鹽能力較強(qiáng)的菌株,并研究其抑菌性、傳代穩(wěn)定性、酶活特性和凍干存活率。結(jié)果表明,分離獲得的56株菌株中,乳酸菌3-2-5-1'和P-3-3-2的發(fā)酵性能較好,發(fā)酵48h后pH和總酸含量分別為3.76、2.13%和3.63、2.17%;兩株菌的耐鹽性好,對亞硝酸鹽的降解能力較強(qiáng),降解率分別為82.99%和83.43%;對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌抑制作用較強(qiáng),抑菌圈直徑分別為18.45mm、17.42
3、mm、15.65mm及15.26mm、9.26mm、12.34mm;傳代穩(wěn)定性較好,凍干存活率分別為81.43%和85.37%;氨基酸脫羧酶試驗結(jié)果皆為陰性。經(jīng)16S rDNA測序發(fā)現(xiàn),菌株3-2-5-1'為植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum),菌株P(guān)-3-3-2為發(fā)酵乳桿菌(Lactobacillus fermentum)。
(2)乳酸菌增殖培養(yǎng)基的優(yōu)化。在基礎(chǔ)培養(yǎng)基、氮源、碳源、生長因子等單因素試驗的
4、基礎(chǔ)上,應(yīng)用Plackett-Burman實(shí)驗設(shè)計,確定影響兩株菌增殖的關(guān)鍵因子,通過響應(yīng)面法優(yōu)化了因子水平。
3-2-5-1'增菌培養(yǎng)基最優(yōu)的組合為乳清粉10.29%、葡萄糖2.03%、檸檬酸鈉0.52%、大豆分離蛋白粉1%、碳酸鈣0.3%以及胡蘿卜、汁8%,接種3%發(fā)酵劑,30℃培養(yǎng)24h,活菌數(shù)達(dá)2.63×109CFU/mL。P-3-3-2的最佳配方組合為:乳清粉5.84%、碳酸鈣0.32%、胡蘿卜為8.33%、大豆分離
5、蛋白粉1%、低聚果糖1%以及磷酸氫二鉀0.3%,P-3-3-2在此培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h后活菌數(shù)達(dá)到2.69×109CFU/mL。
(3)乳酸菌發(fā)酵對蓮藕泡菜質(zhì)構(gòu)和風(fēng)味的影響研究。通過單菌和混菌接種試驗,以質(zhì)構(gòu)、pH、總酸、色度和感官為指標(biāo),確定最佳菌株組合為3-2-5-1'∶P-3-3-2∶Y430(實(shí)驗室產(chǎn)香菌株)=1∶1∶1。
通過單因素試驗研究了發(fā)酵條件和輔料添加對蓮藕質(zhì)構(gòu)和風(fēng)味的影響。以溫度、鹽濃度和接種量為因
6、素,總酸、硬度和感官評分作為評價指標(biāo),進(jìn)行了三因素三水平正交試驗,確定最佳發(fā)酵條件為接種量10%,溫度25℃,鹽濃度2%,發(fā)酵7d泡菜的總酸為1.021%,硬度為43.0N,感官得分86分。根據(jù)PB實(shí)驗選出輔料添加的主要影響因子,分別為糖、辣椒及香料。通過響應(yīng)曲面法,以感官評價為響應(yīng)值,確定了輔料添加的最佳配方:糖添加量為1.83%、香料添加量為3.61‰、辣椒添加量為1.84%,此配方制成的蓮藕泡菜感官得分為92分。驗證了輔料添加試驗
7、的結(jié)果,按照上述條件發(fā)酵蓮藕,各項指標(biāo)的值分別為硬度49.2N,色度77.65,pH為3.49,總酸1.09%,感官評分為90分。
(4)純種發(fā)酵泡菜與自然發(fā)酵泡菜的比較研究。對比發(fā)酵過程中理化指標(biāo)和微生態(tài)變化發(fā)現(xiàn):純種發(fā)酵有利于產(chǎn)酸和乳酸的積累,25℃發(fā)酵9d后pH和總酸分別為3.2和1.292%;純種發(fā)酵前期還原性VC低于自然發(fā)酵,5d后高于自然發(fā)酵;純種發(fā)酵有利于泡菜氨基氮的保存,平衡后維持在0.1%;整個發(fā)酵過程中純種
8、發(fā)酵的質(zhì)構(gòu)和色度都維持在較高水平,發(fā)酵9d后硬度為39.8N,色度為72;發(fā)酵成熟后亞硝酸鹽含量較低,在0.6mg/kg左右波動;純種發(fā)酵9d后乳酸菌數(shù)仍能達(dá)到4×108CFU/mL,菌落總數(shù)、霉菌數(shù)和大腸菌數(shù)在整個發(fā)酵過程中都低于自然發(fā)酵,而酵母菌數(shù)除第1d高于自然發(fā)酵外,發(fā)酵中后期都處于較低水平。
通過GC-MS法對純種發(fā)酵和自然發(fā)酵蓮藕泡菜進(jìn)行揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的分析,檢測出揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)分別為69和54種,其中相同的有27
9、種。兩種發(fā)酵方式蓮藕的主體揮發(fā)性風(fēng)味組分是醚類、醇類和烯類。其中醚類分別占了61.89%和60.98%,為兩者的風(fēng)味做出了較大的貢獻(xiàn)。醇類、醛類、烴類、酸類、烯類和含硫化合物在純種發(fā)酵泡菜中的相對含量高于其在自然發(fā)酵組中的相對含量,酮類、醚類和酯類物質(zhì)則相反。從香氣物質(zhì)種類與相對含量來看,純種發(fā)酵優(yōu)于自然發(fā)酵。
通過HPLC法分析純種發(fā)酵和自然發(fā)酵的蓮藕泡菜中生物胺種類和含量。在所檢測的單體生物胺中,除亞精胺外,自然發(fā)酵的蓮藕
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