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1、目的:研究超支化聚磷酸酯納米藥物引導(dǎo)的光熱療法用于逆轉(zhuǎn)乳腺癌細(xì)胞多藥耐藥。
方法:1.構(gòu)建包載阿霉素和或IR-780的PEG化的超支化聚磷酸酯納米藥物(NP/DOX、NP/IR-780和 NP@DOX+780)的輸送系統(tǒng)。通過納米沉淀法以 PEG化的超支化聚磷酸酯為基礎(chǔ)構(gòu)建載藥顆粒,并對(duì)其進(jìn)行表征,包括粒徑、表面電勢(shì)、在介質(zhì)中釋放行為及光熱曲線。
2.利用多藥耐藥腫瘤細(xì)胞 MCF-7/ADR及 MCF-7為模型,使用
2、構(gòu)建好的包載阿霉素和或 IR-780的 PEG化的超支化聚磷酸酯納米藥物(NP/DOX、NP/IR-780和NP@DOX+780)的輸送系統(tǒng),研究其逆轉(zhuǎn)乳腺癌多藥耐藥的行為及效果。利用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)納米顆粒內(nèi) DOX的濃度。通過流式細(xì)胞儀、激光掃描共聚焦顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞攝取,利用MTT實(shí)驗(yàn)證明其對(duì)細(xì)胞的抑制作用。
3.以多藥耐藥腫瘤細(xì)胞 MCF-7/ADR構(gòu)建動(dòng)物模型。通過小動(dòng)物成像監(jiān)測(cè)納米藥物的臟器分布及腫瘤富集。并通過腫
3、瘤抑制曲線研究納米藥物化療聯(lián)合光熱治療的治療效果,通過小鼠的體重計(jì)精神狀況觀察、藥物的毒副反應(yīng)。
結(jié)果:1.成功設(shè)計(jì)和合成含有磷酸酯鍵和 PEG的超支化聚合物,其可以自組裝成核-殼納米顆粒。該設(shè)計(jì)策略實(shí)施以有效克服腫瘤藥物抗性并且顯示出改善癌癥治療巨大潛力。
2.細(xì)胞試驗(yàn)中,通過流式細(xì)胞儀、激光掃描共聚焦顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞攝取,證明NP/DOX通過內(nèi)吞方式進(jìn)入細(xì)胞,在細(xì)胞內(nèi)釋放出藥物,并可避開P-gp的作用,使DOX在
4、MCF-7/ADR細(xì)胞中富集。利用 MTT實(shí)驗(yàn)證明其對(duì)細(xì)胞的抑制作用,與游離DOX相比,NP/DOX可顯著增加對(duì)細(xì)胞的殺傷作用,有效克服腫瘤細(xì)胞耐藥性。
3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明了光熱療法和化療療法的聯(lián)合應(yīng)用具有更高的療效并且可逆轉(zhuǎn)耐藥細(xì)胞腫瘤模型中的耐藥性。
結(jié)論:成功地合成了 PEG化的超支化聚磷酸酯,聯(lián)合化療和光熱療法用于逆轉(zhuǎn)癌癥中的耐藥性,其通過EPR效應(yīng)具有較長(zhǎng)的循環(huán)時(shí)間和在腫瘤組織內(nèi)的富集作用,并且提供了克服耐藥
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