鹽酸地芬尼多在中毒大鼠體內(nèi)死后再分布的研究.pdf

1、目的1.建立鹽酸地芬尼多中毒死亡、死后再分布、死后彌散的動物模型，觀察動物的中毒表現(xiàn)和死后各組織臟器的病理變化； 2.研究鹽酸地芬尼多致死動物體內(nèi)的死后分布和死后再分布，為鹽酸地芬尼多中毒死亡案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供科學(xué)依據(jù)； 3.研究鹽酸地芬尼多在家兔體內(nèi)的死后彌散特點，探討死后再分布的可能機制。 方法1.動物模型及檢材采集和處理1.1死后分布模型大鼠22只，分兩組(1600mg/kg、800mg/kg)。第1組6

2、只，鹽酸地芬尼多1600mg/kg灌胃。第2組16只，鹽酸地芬尼多800mg/kg灌胃，觀察4小時，未死者，頸椎脫臼致死。待呼吸和心跳全部消失時，迅速解剖大鼠，取腦、心、肺、肝、脾、腎、腦、胃和心血等組織臟器和體液，檢測其中鹽酸地芬尼多含量。 1.2死后再分布模型大鼠30只，分別灌服鹽酸地芬尼多800mg/kg，觀察4小時，頸椎脫臼致死。待染毒大鼠呼吸和心跳全部消失后，立即分別置于室溫下，分別于死后0，4，8，16，24，48，

3、72小時提取大鼠的心血、心、肝、脾、肺、腎、腦、肌肉(左腿)和心血，檢測其中鹽酸地芬尼多含量。 1.3死后彌散動物模型1.3.1死后彌散家兔24只完全夾閉氣管12分鐘后，分別經(jīng)灌胃管灌入鹽酸地芬尼多400mg/kg，分別于灌胃后1、3、6、12、24、48、72、96小時各解剖3只，取材。 1.3.2劑量對死后彌散影響家兔12只，分4組，完全夾閉氣管12分鐘后，分別經(jīng)灌胃管灌入鹽酸地芬尼多400mg/kg、200mg/k

4、g、80mg/kg、40mg/kg，24小時后取材。 1.3.3死后灌胃時間對死后彌散影響家兔12只，分4組，完全夾閉氣管12分鐘后0分鐘、30分鐘、60分鐘、120分鐘分別經(jīng)灌胃灌入鹽酸地芬尼多400mg/kg，24小時后取材。 采取家兔的心、肝、脾、肺、腎、腦、肌肉、心血、外周血、膽汁和尿，檢測其中鹽酸地芬尼多含量。 2.病理觀察取死后分布模型腦、心、肝、脾、肺、腎等組織，用4％甲醛固定，石蠟包埋，切片，HE

5、染色，光鏡觀察。 3.鹽酸地芬尼多檢測方法樣品勻漿后，加入內(nèi)標，經(jīng)酸、堿處理后，乙醚萃取，氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測，根據(jù)鹽酸地芬尼多的特征離子峰、保留時間定性，工作曲線法定量。 結(jié)果1.癥狀3.2倍LD50劑量組大鼠在灌藥后3～5min即出現(xiàn)興奮、呼吸急促、抽搐癥狀，間隔5～6秒抽搐一次，每次抽搐持續(xù)6～7秒，15分鐘之內(nèi)死亡。LD50的1.6倍劑量組大鼠在灌藥后3～5min即出現(xiàn)興奮、呼吸急促、抽搐癥狀，持續(xù)5

6、min，之后出現(xiàn)嗜睡，其中6只大鼠在20～30分鐘之間再次出現(xiàn)呼吸困難、抽搐死亡，另外10只處于嗜睡癥狀，刺激反應(yīng)減弱。 2.病理變化大鼠主要臟器改變基本相似，均呈現(xiàn)明顯的非特異的急死征象。 3.死后分布1.6倍LD50劑量(800mg/kg)在給藥后30分鐘內(nèi)6只大鼠死亡，其各臟器內(nèi)鹽酸地芬尼多濃度由高向低分別為胃＞肺＞肝＞心＞腎＞心血＞脾和腦；1.6倍LD50劑量(800mg/kg)4小時處死后大鼠體內(nèi)鹽酸地芬尼多濃

7、度由高向低為胃＞肺＞脾＞腎＞肝＞心＞腦＞心血；3.2倍LD50劑量(1600mg/kg)組均在15分鐘內(nèi)死亡，其各臟器濃度由高向低分別為胃＞心血、心＞脾＞肺＞腎＞肝＞腦。 4.死后再分布本實驗結(jié)果顯示鹽酸地芬尼多在灌胃染毒大鼠死后體內(nèi)含量變化明顯。心血、心、肝、肺中鹽酸地芬尼多含量變化較大，而肌肉及腦組織中鹽酸地芬尼多含量變化較小。室溫下，大鼠心血、心、肝內(nèi)鹽酸地芬尼多含量呈現(xiàn)先比較穩(wěn)定后明顯升高再下降的趨勢；腎臟呈現(xiàn)出先降低后

8、升高的趨勢；肺臟呈現(xiàn)出先降低后升高再降低的趨勢；脾臟呈現(xiàn)出先下降后穩(wěn)定最后上升；腦組織和肌肉中鹽酸地芬尼多含量則變化不大。 5.死后彌散鹽酸地芬尼多在家兔體內(nèi)發(fā)生死后彌散現(xiàn)象。鹽酸地芬尼多在死后灌胃家兔體內(nèi)含量變化明顯。在灌胃后1小時，除肌肉、腦組織外，其余組織和體液中均檢出鹽酸地芬尼多。心、脾、肺、腎、尿中鹽酸地芬尼多含量變化較大，心血、肝、膽汁、外周血中鹽酸地芬尼多含量變化較小。鹽酸地芬尼多在死后不同時間灌胃家兔體內(nèi)含量變化

9、明顯。心、脾、肺、腎和尿中鹽酸地芬尼多含量變化較大，心血、肝、膽汁和外周血中鹽酸地芬尼多含量變化較小，腦和肌肉中未檢出。鹽酸地芬尼多在死后同一時間不同劑量灌胃家兔體內(nèi)含量變化明顯。心、脾、肺中鹽酸地芬尼多含量變化較大，心血、肝、膽汁、外周血中鹽酸地芬尼多含量變化較小，腦和肌肉中未檢出。 結(jié)論1.本研究建立了鹽酸地芬尼多灌胃致死、死后再分布和死后彌散的動物模型。中毒死亡大鼠各臟器都呈急死征象。本文所建立的模型均可應(yīng)用于鹽酸地芬尼多

10、口服中毒死亡案件的法醫(yī)學(xué)研究。 2.鹽酸地芬尼多在不同劑量致死及同一劑量不同時間死亡或處死大鼠體內(nèi)分布趨勢不完全相同。此分布特點可應(yīng)用于鹽酸地芬尼多中毒死亡的法醫(yī)學(xué)鑒定；對鹽酸地芬尼多中毒死亡案件進行法醫(yī)學(xué)鑒定時，需采取心血、心、肝、肺、脾、腎等高血流灌注及富血組織進行全面定性和定量分析。 3.鹽酸地芬尼多在灌胃中毒致死大鼠體內(nèi)存在死后再分布現(xiàn)象。鹽酸地芬尼多在家兔體內(nèi)可發(fā)生死后彌散，與彌散距離、死后灌胃時間和劑量等因素