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文檔簡介
1、目的:
1.尋找可靶向結合腎母細胞瘤抑制基因1(WT1)的潛在miRNA,并闡明其結合WT1后的效應;
2.研究miR743a對后腎間充質細胞增殖、凋亡能力的影響。
方法:
1.應用熒光素酶報告分析實驗,分析miR743a靶向結合WT1的3'UTR的能力;
2.應用熒光定量PCR分析及免疫印跡實驗,比較抑制WT1上miR743a結合位點前后WT1在mRNA和蛋白水平的表達變化;
2、 3.應用EDU增殖實驗及WT1 rescue實驗,研究miR743a對后腎間充質細胞增殖能力的影響;
4.應用細胞凋亡實驗及WT1 rescue實驗,研究miR743a對后腎間充質細胞凋亡能力的影響;
5.所有的樣品檢測三次。所有的結果均為平均值±SD和進行配對t檢驗。我們使用GraphPad Prism5軟件(GraphPad,圣地亞哥,CA, USA)進行數(shù)據(jù)分析,得到柱狀圖。 P<0.05有統(tǒng)計學意義。
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