Toll樣受體4在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)心肌肥厚中的作用.pdf

1、目的：
　　本文旨在探討TLR4在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)心肌肥厚中的作用，為臨床上抑制心肌肥厚提供新的切入點。
　　方法：
　　選取21只8-10周齡重20-25g的清潔級C57BL/6雄性小鼠，隨機(jī)分成正常對照組即對照組，心肌肥厚組即肥厚組，心肌肥厚藥物干預(yù)組即肥厚干預(yù)組，每組7只。3組均皮下埋植微量緩釋泵，對照組以1.3mg/Kg/d的速度連續(xù)泵入生理鹽水(normal saline,NS)，肥厚組及肥厚干預(yù)組以1.3m

2、g/Kg/d的速度連續(xù)泵入血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)。期間對照組與肥厚組每周2次腹腔注射生理鹽水，肥厚干預(yù)組每周2次腹腔注射TLR4拮抗劑TAK242。觀察4周后處死小鼠、取出心臟，測量全心質(zhì)量及脛骨長度。將心臟置于4℃預(yù)冷后的NS中沖洗3遍，修剪周圍多余的組織，切取左心室中段，置于10％的福爾馬林中，經(jīng)過脫水和石蠟包埋后組織切片，分別行HE染色，Massons染色，波形蛋白免疫組化染色。應(yīng)用光學(xué)顯微鏡對比觀察染

3、色結(jié)果，應(yīng)用ImageJ軟件測量各組心肌細(xì)胞和細(xì)胞核的橫截面積，膠原纖維的容積分?jǐn)?shù)和波形蛋白的平均光密度。應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以p＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1 三組心肌大體形態(tài)改變:
　　1.1 全心質(zhì)量指數(shù)（即全心質(zhì)量/體質(zhì)量）:對照組為4.3857±0.2215mg/g，肥厚組為5.7100±0.3321mg/g，肥厚干預(yù)組為4.8000±0.1573mg/g，對照組與肥

4、厚組、肥厚組與肥厚干預(yù)組、肥厚干預(yù)組與對照組比較，p值均＜0.05。
　　1.2 心脛比（即全心質(zhì)量/脛骨長度）:對照組為6.4557±0.3519mg/mm，肥厚組為9.3271±0.4077mg/mm，肥厚干預(yù)組為7.5586±0.3691mg/mm，對照組與肥厚組、肥厚組與肥厚干預(yù)組、肥厚干預(yù)組與對照組比較，p值均＜0.05。
　　2 三組心肌細(xì)胞形態(tài)改變:
　　2.1 心肌細(xì)胞橫截面積:對照組為1756.46±

5、240.026um2，肥厚組為3509.29±438.244um2，肥厚干預(yù)組為3123.52±759.536um2，對照組與肥厚組、肥厚組與肥厚干預(yù)組、肥厚干預(yù)組與對照組比較，p值均＜0.05。
　　2.2 心肌細(xì)胞核橫截面積:對照組為255.02±60.953um2，肥厚組為374.46±134.247um2，肥厚干預(yù)組為301.94±51.239um2，對照組與肥厚組、肥厚組與肥厚干預(yù)組、肥厚干預(yù)組與對照組比較，p值均＜0.

6、05。
　　2.3 心肌細(xì)胞排列形態(tài):對照組與肥厚組相比，肥厚組心肌細(xì)胞排列紊亂;肥厚干預(yù)組與肥厚組相比，排列紊亂程度有所減輕，但仍重于對照組。
　　3 三組心肌膠原纖維改變:
　　膠原纖維容積分?jǐn)?shù):對照組為1.89±0.031％，肥厚組為6.81±1.156％，TAK242干預(yù)組為5.01±0.097％，對照組與肥厚組、肥厚組與肥厚干預(yù)組、肥厚干預(yù)組與對照組比較，p值均＜0.05。
　　4 三組心肌波形蛋白改變

7、:
　　波形蛋白平均光密度值:對照組為0.112±0.004，肥厚組為0.213±0.007，TAK242干預(yù)組為0.136±0.002，對照組與肥厚組、肥厚組與肥厚干預(yù)組、肥厚干預(yù)組與對照組比較，p值均＜0.05。
　　結(jié)論：
　　1 AngⅡ誘導(dǎo)的心肌肥厚，主要表現(xiàn)為心肌細(xì)胞排列紊亂、心肌細(xì)胞和胞核的橫截面積增大、間質(zhì)和血管周圍膠原纖維增多、波形蛋白含量增加。
　　2 應(yīng)用TLR4拮抗劑TAK242后，Ang