梔子提取物對Aβ1-40及H2O2所致的PC12細胞損傷的保護作用.pdf

1、本文系統(tǒng)研究了梔子提取物在神經保護方面的作用，為梔子作為功能食品的開發(fā)提供理論基礎，并為其對AD的預防和治療作用提供依據。采用MTT比色法，以細胞存活率作為指標，不同濃度的Aβ1-40或H2O2處理PC12細胞24 h，確定最佳損傷劑量;并判定梔子的6種單體（梔子苷、京尼平、熊果酸、梔子酸、藏紅花素1和2），及四種提取方法（超聲、亞臨界、回流、微波）對PC12細胞增殖的影響，并比較它們對兩種損傷模型的保護作用。試劑盒生化法檢測培養(yǎng)液中L

2、DH活力，T-SOD及GSH-PX等抗氧化酶的活力，及MDA含量的變化，初步探討梔子提取物保護作用的機理。運用HPLC對四種粗提物進行成分分析。結果如下:
　　1.細胞損傷模型的建立:與正常培養(yǎng)細胞存活率比較結果顯示，20μmol/l的Aβ1-40或100μmol/l的H2O2處理PC12后，有極顯著差異(P＜0.01)，且細胞存活率下降到50％，造模最佳。
　　2.梔子單體及提取方法對損傷模型的保護作用:與模型組細胞存活率

3、相比，單體中梔子苷、京尼平、熊果酸和藏紅花素均有顯著差異(P＜0.05)，京尼平、梔子苷差異極顯著(P＜0.01);四種提取方法都有顯著性差異，亞臨界差異極顯著(P＜0.01)。
　　3.各組LDH、T-SOD、GSH-PX及MDA檢測結果:與模型組相比，梔子苷、京尼平、熊果酸和藏紅花素，及四種方法制備的粗提物均使有LDH、MDA含量降低，T-SOD、GSH-PX活力增加(P＜0.05);各組間相比，京尼平、亞臨界及梔子苷的作用最

4、強。
　　4.四種粗提物的神經保護作用成分分析:四種粗提物中均含有梔子苷、京尼平、藏紅花素，亞臨界提取物中含量較高。梔子粗提物的保護作用強于單體。
　　針對Aβ1-40和H2O2損傷模型，梔子苷、京尼平和藏紅花素，及四種方法制備的粗提物均有保護作用，京尼平、梔子苷及亞臨界提取物保護作用最強。這些保護成分可通過降低LDH活力，增加T-SOD及GSH-PX的活力，及減少MDA的含量發(fā)揮其抗Aβ1-40和H2O2損傷作用。亞臨界乙