白術(shù)內(nèi)酯I下調(diào)MyD88+人卵巢癌細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制作用—T細(xì)胞亞群(CD3+CD4+、CD3+CD8+及Treg)的分布變化.pdf

1、研究目的：
　　檢測(cè)健康成年女性外周血T細(xì)胞與不同濃度白術(shù)內(nèi)酯I誘導(dǎo)后的MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞上清共培養(yǎng)后，T細(xì)胞亞群（CD3+CD4+、CD3+CD8+及Treg）的分布改變；探究白術(shù)內(nèi)酯I是否可以下調(diào)MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制作用。
　　研究方法：
　　不同濃度白術(shù)內(nèi)酯I誘導(dǎo)MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞，獲得培養(yǎng)上清后，與健康成年女性外周血分離的T細(xì)胞共培養(yǎng)24小時(shí)，用

2、流式細(xì)胞儀測(cè)定T細(xì)胞亞群CD3+CD4+、CD3+CD8+及Treg百分比，并計(jì)算CD4+/ CD8+比值。
　　研究結(jié)果：
　　1、SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組的CD3+CD4+表達(dá)(40.453±0.270)低于正常T細(xì)胞組(48.247±0.385)，而 CD3+CD8+表達(dá)(30.233±0.258)高于正常 T細(xì)胞組(26.580±0.295)，其 CD4+/CD8+比值(1.338±0.016)顯著低于正常

3、T細(xì)胞組(1.815±0.029)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；SKOV-3細(xì)胞上清處理 T細(xì)胞組的Foxp3表達(dá)（10.260±0.782)明顯高于正常T細(xì)胞組(7.340±0.458)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；
　　2、不同濃度白術(shù)內(nèi)酯I誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組的CD4+/ CD8+比值，100umol/L(1.742±0.063)、50umol/L(1.434±0.032)、10umol/L(

4、1.358±0.018)均高于SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組(1.338±0.016)，且白術(shù)內(nèi)酯I的濃度越高，比值越高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；不同濃度白術(shù)內(nèi)酯I誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組的Foxp3表達(dá)，100umol/L(2.667±0.180)、50umol/L(3.547±0.309)、10umol/L(4.573±0.191)均低于SKOV-3細(xì)胞組(10.260±0.782)，且白術(shù)內(nèi)酯I的濃度越高，

5、Foxp3值越低；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；
　　3、LPS誘導(dǎo)SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組的CD3+CD8+表達(dá)(33.573±0.828)高于 SKOV-3細(xì)胞上清處理 T細(xì)胞組(30.233±0.258)，而 CD3+CD4+表達(dá)(29.740±0.675)低于SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組(40.453±0.270)，CD4+/ CD8+值(0.890±0.028)也明顯低于SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組(

6、1.338±0.016)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；LPS誘導(dǎo) SKOV-3細(xì)胞上清處理 T細(xì)胞組的 Foxp3值(10.807±0.430)高于SKOV-3細(xì)胞上清處理T細(xì)胞組(10.260±0.782)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1. MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞培養(yǎng)上清內(nèi)，存在大量免疫抑制因子，其上清處理T細(xì)胞后，能夠抑制 CD3+CD4+T細(xì)胞表達(dá)，相對(duì)增加CD3+CD8+T

7、細(xì)胞表達(dá)，從而降低CD4+/CD8+比值，并促進(jìn)Treg表達(dá)，使機(jī)體處于免疫抑制狀態(tài)；而LPS可以促進(jìn)其免疫抑制作用；
　　2.白術(shù)內(nèi)酯 I可能通過(guò)阻斷 TLR4/MyD88通路，在一定濃度范圍內(nèi)，以濃度依賴方式，下調(diào)MyD88+人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞分泌的免疫抑制因子，從而促進(jìn)T細(xì)胞亞群CD3+CD4+表達(dá)，增加其分布百分比，相對(duì)抑制CD3+CD8+表達(dá)，減少其分布百分比，從而升高CD4+/CD8+比值，激發(fā)機(jī)體免疫功能；抑制