5-HT-,2C-受體對(duì)人星型膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞腦啡肽酶基因和蛋白表達(dá)的調(diào)控.pdf

1、阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease，AD）是一種進(jìn)行性發(fā)展的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。目前研究認(rèn)為β淀粉樣蛋白（amyloid-β protein，Aβ）的聚積，進(jìn)而對(duì)神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生損害是AD發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié)。腦啡肽酶（neprilysin，NEP）是腦內(nèi)β淀粉樣蛋白降解的主要限速酶，提高AD患者腦內(nèi)NEP的表達(dá)量可促進(jìn)β淀粉樣蛋白的分解。以往的研究表明，5-HT2C受體激動(dòng)后增加淀粉樣蛋白前體蛋白（APP）向α分泌

2、酶方向的加工，那么是否會(huì)增加降解β淀粉樣蛋白的NEP的表達(dá)，尚未見(jiàn)報(bào)道。因此，本課題以人星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U251作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，探討5-HT2C受體對(duì)NEP基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用，以期為AD的預(yù)防和治療奠定一定的理論基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)采用RT-PCR，熒光定量RT-PCR和Western blot技術(shù)，分別從mRNA水平和蛋白水平檢測(cè)5-HT2C受體激動(dòng)劑m-CPP，5-HT2C受體拮抗劑RS 102221對(duì)NEP的調(diào)控作用。

3、 應(yīng)用濃度為10-8~10-5mol/L的特異性5-HT2C受體激動(dòng)劑m-CPP處理U251細(xì)胞，可濃度、時(shí)間依賴(lài)性地促進(jìn)NEP mRNA的表達(dá)，與未加藥物刺激的空白對(duì)照組相比有非常顯著的差異（p<0.01）。該促進(jìn)作用可被特異性5-HT2C受體拮抗劑RS 102221所抑制，并通過(guò)繪制抑制曲線(xiàn)求得半數(shù)抑制濃度IC50 = 2.91 ×10-9 mol/L。同樣地，應(yīng)用濃度為10-9~10-6 mol/L的m-CPP處理U251細(xì)胞