淫羊藿總黃酮聯(lián)合吡柔比星抗人骨肉瘤MG-63細(xì)胞的作用機(jī)制.pdf

1、目的：探討淫羊藿總黃酮（EF）與吡柔比星（THP）聯(lián)用體外抗人骨肉瘤MG-63細(xì)胞的作用機(jī)制。
　　方法：設(shè)立空白對(duì)照組和EF組（EF濃度：50、100、200、400、800μg·mL-1）、THP組（THP濃度：1、2、4、8、16μg·mL-1）及兩藥聯(lián)合組（EF+THP濃度：50+1、100+2、200+4、400+8、800+16μg·mL-1）三個(gè)實(shí)驗(yàn)組，利用倒置相差顯微鏡觀察不同時(shí)間段各組細(xì)胞形態(tài)；作用48小時(shí)后，采

2、用CCK-8法檢測(cè)各組不同濃度的細(xì)胞抑制率，根據(jù)中效原理計(jì)算兩藥聯(lián)用的聯(lián)合指數(shù)（CI），分析其相互作用；采用Annexin V-FITC/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡情況；RT-PCR及Western-blotting檢測(cè)Caspase-3、P21、Bcl-2 mRNA及其蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞呈不同程度凋亡狀態(tài)，細(xì)胞增殖抑制率隨藥物濃度增加呈遞增趨勢(shì)，聯(lián)合組細(xì)胞增殖抑制率及凋亡率均明顯高于兩單藥組（P<0.0

3、5），聯(lián)合組抑制率在10~90％時(shí)CI值處于0.374~0.770之間；EF和THP均能使Caspase-3、P21 mRNA及蛋白的表達(dá)明顯下降，使Bcl-2 mRNA及蛋白的表達(dá)上升（P<0.05），聯(lián)合組趨勢(shì)更明顯（P<0.05）。
　　結(jié)論：EF和THP明顯抑制骨肉瘤MG-63細(xì)胞活性，并且通過上調(diào)二者Caspase-3、P21 mRNA及其蛋白、下調(diào)Bcl-2 mRNA及其蛋白的表達(dá)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合后，細(xì)胞抑制率在