孔石莼中體外抗氧化活性物質(zhì)的研究.pdf

1、孔石莼是一種大型海洋經(jīng)濟(jì)綠藻,在我國(guó)資源十分豐富。其味道鮮美,具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與藥用價(jià)值。近些年來(lái),孔石莼的工廠化育苗與人工養(yǎng)殖技術(shù)日趨完善,但關(guān)于它生物活性的研究還處于起步階段,遠(yuǎn)遠(yuǎn)跟不上養(yǎng)殖栽培的步伐,尤其是抗氧化生物活性,亟待開展研究工作對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)。
　　本論文選取孔石莼作為研究對(duì)象,以自由基清除能力為體外抗氧化評(píng)價(jià)指標(biāo),篩選、分離、鑒定了孔石莼中的抗氧化物質(zhì),以期將孔石莼抗氧化活性的研究成果應(yīng)用到天然抗氧化劑、疾病

2、治療藥物的開發(fā)上來(lái)。本研究主要取得如下研究成果:
　　(1)采用超聲輔助提取技術(shù),用乙醇水溶液對(duì)孔石莼進(jìn)行了提取,研究考察了浸提溫度、浸提料液比、乙醇濃度、超聲時(shí)間對(duì)可溶性固形物得率的影響,通過(guò)一系列單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)分析,對(duì)孔石莼粗提物的提取條件進(jìn)行了優(yōu)化,并對(duì)優(yōu)化結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證。結(jié)果表明,最佳的提取條件為:浸提溫度60℃、浸提料液比1:25g/ml、乙醇濃度60％、超聲時(shí)間2h;在此條件下,孔石莼中可溶性固形物的平均得率為1

3、1.81%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.53%,表明結(jié)果具有較高的精密度與可靠性。
　　(2)采用液—液萃取方法對(duì)孔石莼的粗提物進(jìn)行初步分離,以ABTS自由基清除能力、羥基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力為檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行綜合分析。結(jié)果顯示,正丁醇層具有較好的抗氧化能力。實(shí)驗(yàn)選用D101型大孔樹脂對(duì)正丁醇層做進(jìn)一步的分離純化,用不同濃度的乙醇溶液進(jìn)行梯度洗脫,洗脫組分檢測(cè)其對(duì)自由基的清除能力,最終篩選出抗氧化能力較強(qiáng)的SR-50

4、組分作下一步的研究分析。為了得到較純的目標(biāo)產(chǎn)物,研究首次應(yīng)用中壓液相色譜快速純化工藝,系統(tǒng)分離純化了SR-50組分,在最適的洗脫條件(氯甲比=94:6)下,純化得到了SR-50-I組分,進(jìn)行相應(yīng)抗氧化能力的分析,發(fā)現(xiàn)SR-50-I組分對(duì)ABTS自由基、羥基自由基、DPPH自由基的清除作用均強(qiáng)于SR-50組分,說(shuō)明經(jīng)過(guò)中壓液相色譜的純化,物質(zhì)中抗氧化活性成分的純度提高了。
　　(3)聯(lián)合應(yīng)用紫外光譜分析、常規(guī)顯色反應(yīng)及液質(zhì)聯(lián)用方法對(duì)