線粒體靶向多肽SS-31對小鼠后肢缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的：
　　1、探討線粒體靶向多肽Szeto-Schiller(SS)-31(D-Arg-dimethylTyr-Lys-Phe-NH2)在后肢缺血再灌注損傷的小鼠模型中能否起到保護作用，并比較預防性和治療性使用SS-31在后肢缺血再灌注損傷小鼠模型的保護作用方面是否存在差異性;
　　方法：
　　1、利用口腔正畸橡皮筋結扎B6小鼠左股骨大轉子1.5h后去除橡皮筋8小時建立后肢缺血再灌注模型;
　　2、給藥方式:預

2、防組:橡皮筋結扎小鼠左股骨大轉子前30分鐘腹腔分別注射生理鹽水或SS-31(5mg/kg);治療組:去除橡皮筋前30分鐘腹腔分別注射生理鹽水或SS-31(5mg/kg);
　　3、應用蛋白質印跡法(western blot)分別檢測不同分組中過氧化氫酶(catalase)、錳-超氧化物歧化酶(Manganese-dependent Superoxide Dismutase，Mn-SOD)、線粒體細胞色素C(Mitochondria

3、l Cytochrome C，Mito Cyt C)、細胞質細胞色素C(Cytoplasm Cytochrome C，Cyto Cyt C)、腫瘤壞死因子α(Tumor Necrosis Factorα，TNF-α)、白細胞介素1β(Interleukin1β，IL-1β)、Bcl-2相關X蛋白(Bcl-2Associated X Protein，BAX)、b細胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2，B

4、cl-2)、未活化型半胱天冬酶3(Pro-Caspase3，Pro-CP3)和活化型半胱天冬酶3(Cleaved-Caspase3，CCP3)的蛋白表達量;應用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測丙二醇(Malondialdehyde，MDA)的含量;應用酶標儀檢測過catalase和Mn-SOD的酶活性;應用熒光素酶法檢測腺嘌呤核瞢三磷酸(Adenosine Triphosphate，ATP)含量;應用陽離子脂質熒光染料JC-1法檢測線粒體膜

5、電位(Mitochondrial Membrane Potential，MMP)，應用統(tǒng)計學方法分析各組中上述數(shù)據(jù)的差異性，結合病理組織的蘇木精—伊紅染色圖（Hematoxylin-Eosin staining，HE染色）和線粒體電鏡圖綜合評價SS-31在小鼠后肢缺血再灌注損傷的模型中能否起到保護作用，并比較預防性和治療性使用SS-31在后肢缺血再灌注損傷小鼠模型的保護作用方面是否存在差異性。
　　結果：
　　1.SS-31

6、無論預防性還是治療性給藥都能減少缺血再灌注肌肉組織中炎性細胞的浸潤，減輕肌纖維的變性壞死，有一定的保護作用。
　　2.SS-31能夠減少脂質過氧化MDA的產生并且提高抗氧化酶Mn-SOD和catalase的蛋白表達量和酶活性，從而提高肌肉組織的抗氧化能力。
　　3.電鏡所示SS-31能夠更好的保持線粒體結構的完整性，檢測指標也顯示，SS-31能有效保護線粒體的功能。
　　4.肌肉組織的炎癥反應在SS-31的處理下得到了