小白菊內(nèi)酯和蛋白激酶C抑制劑誘導結腸癌HT-29細胞凋亡的機制.pdf

1、目的:探討小白菊內(nèi)酯(Parthenolide)和蛋白激酶C抑制劑(PKC抑制劑)在結腸癌細胞(HT-29)增殖以及凋亡的作用及其機制。
　　方法:體外培養(yǎng)人結腸癌細胞株HT-29，運用MTT法測定不同濃度PTL(1μ mol/L，3μ mol/L,5μmol/L，7μmol/L)和PKC抑制劑(0.5μ mol/L，1μmol/L,2μ mol/L，4μmol/L)以及聯(lián)合用藥（7μ mol/LPTL+2μ mol/LPKC抑制

2、劑）對HT-29細胞增殖抑制率;Western blot法檢測GRP78以及CHOP等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關蛋白的表達改變，流式細胞術及細胞劃痕法，檢測HT-29細胞的初期凋亡率以及增生遷移狀況;
　　結果:1.PTL以及PKC抑制劑抑制HT-29細胞的增殖，同時伴隨藥物濃度的提高抑制效果也隨著加大，二者同時使用具有最大化的抑制效果，差異存在明顯的統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。流式細胞儀測定表明PTL同PKC抑制劑作用24h以后對HT-29

3、細胞的早期凋亡率相對于對照組較高(P＜0.01)，2.二者同時使用早期凋亡率較PTL組、PKC抑制劑組以及對照組為高(P＜0.01)。3.細胞劃痕實驗表明，二組的細胞遷移能力小于對照組，二者同時使用組細胞遷移能力是最小的。4.Western blot最終表明PTL與PKC抑制劑以及聯(lián)合用藥在作用于HT-29細胞24小時以后，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關蛋白GRP78與CHOP的表達水平升高，而聯(lián)合用藥組蛋白表達水平升高得最多。
　　結論:1.P