肺癌原發(fā)灶與縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)EGFR突變差異的相關(guān)研究.pdf

1、背景和目的：
　　肺癌是全球最常見(jiàn)的癌癥，估計(jì)每年有160萬(wàn)新發(fā)病患者（占惡性腫瘤的12.7％），占癌癥死亡病例的26.8%。非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)是肺癌的主要類型，占肺癌總數(shù)的80%~85%。然而絕大多數(shù)肺癌患者在明確診斷時(shí)已屬于III~IV期，肺葉切除加縱隔淋巴結(jié)清掃已經(jīng)不能徹底的根治腫瘤；傳統(tǒng)的鉑類化療療效有限，對(duì)編碼驅(qū)動(dòng)腫瘤細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)的信號(hào)分子的突變癌基因的發(fā)

2、現(xiàn)，促進(jìn)更有效及毒性更小靶向治療飛速進(jìn)展，特別是表皮生長(zhǎng)因子受體-酪氨酸激酶抑制劑（epithelial growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor，EGFR-TKI)對(duì)EGFR基因突變的非小細(xì)胞肺癌患者療效顯著。臨床上一般采用手術(shù)過(guò)程中切取的組織樣本用于基因檢測(cè)，但是晚期肺癌患者往往得不到腫瘤大體標(biāo)本。本項(xiàng)目研究是通過(guò)對(duì)肺癌原發(fā)灶和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)EGFR突變的檢測(cè)，了解肺癌原發(fā)灶和

3、縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)EGFR突變率有無(wú)差異，或者說(shuō)二者之間是否存在異質(zhì)性，通過(guò)檢測(cè)更易取到的縱隔甚至體表轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)就能知道腫瘤的EGFR突變數(shù)據(jù)，最終指導(dǎo)肺癌靶向治療。
　　研究方法：
　　自2015年1月起至2015年12月，收集在我院行手術(shù)切除非小細(xì)胞肺癌和同期手術(shù)時(shí)所清除的縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)標(biāo)本100例。每例患者取肺癌原發(fā)灶標(biāo)本和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)標(biāo)本各1個(gè)。采用PCR擴(kuò)增ARMS法分析NSCLC原發(fā)灶組織中EGFR基因突變與縱隔轉(zhuǎn)

4、移淋巴結(jié)中EGFR基因突變情況:首先分別提取基因組DNA,然后將提取的基因組的DNA應(yīng)用ARMS法擴(kuò)增，分別擴(kuò)增EGFR第18~21號(hào)外顯子，比較兩者突變率。采用SPSS17.0軟件進(jìn)行分析,計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P＞0.05表示肺癌原發(fā)灶與縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)EGFR突變率無(wú)差異。
　　結(jié)果：
　　1、在100名非小細(xì)胞肺癌患者中，年齡42歲~75歲，中位年齡為61歲，其中60歲以上患者共57例，占57%。共

5、檢測(cè)了100例肺癌原發(fā)灶標(biāo)本和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)標(biāo)本。
　　2、本實(shí)驗(yàn)共對(duì)100例非小細(xì)胞肺癌患者原發(fā)灶和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)進(jìn)行了EGFR基因檢測(cè)，其中總共有37例非小細(xì)胞肺癌患者原發(fā)灶檢測(cè)到EGFR基因突變，突變率為37%，在這37例原發(fā)灶有EGFR基因突變的非小細(xì)胞肺癌患者中，總共有34例縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)檢測(cè)到EGFR基因突變，突變率為34%。在入組的100例患者中，同時(shí)有EGFR基因突變的原發(fā)灶和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)34例。肺癌原發(fā)灶和縱隔

6、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)EGFR基因突變共包括18外顯子突變2例，19外顯子突變36例，20外顯子突變2例,21外顯子突變31例。其中1例，化療前有EGFR基因突變，化療后再檢測(cè)基因無(wú)突變。EGFR基因的突變主要集中在外顯子18、19、20、21。其中19號(hào)和21號(hào)外顯子突變率明顯更高。
　　3、絕大多數(shù)NSCLC患者原發(fā)灶和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)EGFR都同時(shí)有突變：91.89%(34/37)或者都同時(shí)沒(méi)有突變：95.45%（63/66）；3例患者肺

7、癌原發(fā)灶有突變，但是縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)沒(méi)有突變，肺癌原發(fā)灶和縱隔淋巴結(jié)EGFR突變一致率達(dá)到：91.89%(34/37)。
　　4、通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，肺癌原發(fā)灶和縱隔淋巴結(jié)EGFR突變率無(wú)差異：p＞0.05。
　　結(jié)論：
　　1、采用PCR擴(kuò)增ARMS法分析NSCLC組織中與縱膈轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中EGFR基因突變，簡(jiǎn)便易行，可行性強(qiáng)。
　　2、通過(guò)研究，我們發(fā)現(xiàn)肺癌原發(fā)灶和縱隔淋巴結(jié) EGFR突變率差異：p＞0.05，肺癌原

8、發(fā)灶與縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)EGFR突變率無(wú)差異，絕大多數(shù)NSCLC患者原發(fā)灶和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)都同時(shí)有突變：91.89%(34/37)，肺癌原發(fā)灶和縱隔淋巴結(jié)EGFR突變率具有一致性。
　　3、NSCLC肺癌原發(fā)灶和縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的 EGFR突變率無(wú)差異，縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的EGFR基因突變數(shù)據(jù)就能代表肺癌原發(fā)灶的EGFR基因突變數(shù)據(jù)。很多晚期肺癌病例雖然不能切取原發(fā)灶腫瘤行 EGFR基因檢測(cè)，但可以取到縱隔轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)行EGFR基因檢測(cè)來(lái)代替