IL-13Rα2對人肺成纖維細胞(HFL-1)TGF-β和膠原蛋白表達的影響.pdf

1、目的：
　　IL-13是一種促纖維化細胞因子，有兩種結構和功能截然不同的受體：IL-13Rα1和IL-13Rα2。IL-13Rα2有三種存在形式：細胞膜表面（mIL-13Rα2）、細胞內以及可溶性形式（sIL-13Rα2），IL-13Rα2與IL-13有高度的親和力，但因其胞內區(qū)很短在過去一直被看作是誘騙受體。有研究表明IL-13Rα2在肺纖維化體內模型可以通過AP-1通路來介導TGF-β的產生從而發(fā)揮信號功能。本課題主要是探討I

2、L-13Rα2與TGF-β之間的關系，判斷IL-13Rα2是否發(fā)揮信號功能來介導肺成纖維細胞TGF-β的產生和膠原蛋白的形成。
　　方法：
　　用不同濃度的IL-13（0，10，20，50，100ng/ml）刺激HFL-1，通過qPCR檢測IL-13Rα1、IL-13Rα2和TGF-β的mRNA表達水平，用Western blot檢測IL-13Rα2和TGF-β蛋白表達水平。siRNA瞬時轉染沉默IL-13Rα2基因，qPC

3、R和Western blot檢測IL-13Rα2和TGF-β的mRNA及蛋白表達量，Western blot檢測collagen的蛋白表達量；轉染后再通過免疫細胞化學熒光標記法觀察和驗證siRNA轉染前后IL-13Rα2和TGF-β的熒光蛋白表達量。
　　結果：
　　結果表明，肺成纖維細胞IL-13Rα2的表達隨著IL-13濃度的增加而增高，高濃度IL-13刺激（50、100 ng/ml）條件下IL-13Rα2表達水平顯著增

4、高（P<0.01）， TGF-β的表達量也增高（P<0.05），IL-13Rα1的表達則無明顯變化（P>0.05）；siRNA干擾沉默IL-13Rα2后，IL-13Rα2的表達量顯著下降（P<0.01），而此時TGF-β的表達量進一步增高（P<0.05），膠原蛋白的表達也增高（P<0.05）。
　　結論：
　　綜合上述數(shù)據(jù)，外源性的IL-13刺激可增強肺成纖維細胞IL-13Rα2和TGF-β表達,而對IL-13Rα1的表達量