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文檔簡介
1、目的:研究玻璃化凍存試劑(cryoprotectantagent,CPA)對于兔髓核細(xì)胞的毒性作用,從而為玻璃化凍存椎間盤選擇合適的凍存試劑。
方法:選取目前最常用的五種玻璃化凍存試劑:二甲基亞砜、甲酰胺、乙二醇、丙二醇、丙三醇,任意兩種及三種CPA互相組合成10種2-CPA,10種3-CPA。用CCK-8和FDA/PI兩種方法檢測髓核細(xì)胞的細(xì)胞存活率。用統(tǒng)計學(xué)方法對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,選出對髓核細(xì)胞毒性較小的玻璃化凍存試劑
2、組合方案,并觀察所選方案對玻璃化凍存兔椎間盤的保存效果。
結(jié)果:兩種檢測方法檢測結(jié)果基本一致,五種玻璃化試劑對髓核細(xì)胞的毒性由小到大依次為:乙二醇、丙三醇、甲酰胺、二甲基亞砜、丙二醇。2-CPA和3-CPA的毒性均比組成該組合溶液的任意一種單一CPA小。組合試劑中,含有乙二醇或丙三醇的2-CPA或3-CPA毒性均較小。玻璃化保存組的兔腰椎間盤髓核細(xì)胞存活率和相對活性均優(yōu)于低溫冷凍組。
結(jié)論:玻璃化凍存椎間盤可選用包含
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