2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、實驗?zāi)康模?br>  1.探討食管鱗癌中LSD1與mTOR通路相互調(diào)控關(guān)系。
  2.探討LSD1抑制劑對食管鱗癌細胞株增殖作用及其分子作用機制,為食管鱗癌的分子靶向治療提供理論基礎(chǔ)。
  實驗方法:
  1.不同食管鱗癌細胞株中 LSD1與 mTOR通路相關(guān)蛋白表達情況。蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測不同食管鱗癌細胞株中LSD1及mTOR通路相關(guān)蛋白PTEN、p-AKT(ser473)、p-P70S6

2、K、Rictor、Raptor的表達水平。
  2. LSD1抑制劑對食管鱗癌細胞株TE-1、ECa109細胞增殖的影響。CCK-8法檢測LSD1抑制劑處理TE-1、ECa109細胞48h后細胞的增殖變化情況。
  3.抑制LSD1對mTOR通路相關(guān)蛋白和組蛋白表達的影響。用LSD1抑制劑分別處理食管鱗癌細胞株 TE-1、ECa10948h后,Western blot法檢測LSD1、PTEN、p-P70S6K及組蛋白H3K4

3、me2的表達水平;用shRNA-LSD1干擾ECa109細胞中LSD1的表達水平,Western blot法檢測檢測LSD1、PTEN、Rictor、Raptor、p-p70S6K的表達水平。
  4.抑制mTOR通路對LSD1的影響。用mTORC1特異性抑制劑雷帕霉素以及ATP競爭性mTORC1/mTORC2雙重抑制劑PP242分別處理ECa109細胞,Western blot法檢測不同濃度的PP242(0,1,5,10μM)、

4、雷帕霉素(0,50,100,200nM)作用24h后對食管鱗癌細胞ECa109中LSD1、Rictor、Raptor及p-p70S6K等蛋白表達的影響。
  實驗結(jié)果:
  1.所選五株食管鱗癌細胞TE-1、ECa109、KYSE450、KYSE750、EC9706均檢測到LSD1表達,且LSD1表達存在差異,在ECa109細胞中LSD1表達較高。
  2. LSD1抑制劑處理后,TE-1、ECa109細胞增殖活力明顯

5、減低,并且mTORC1及mTORC2通路相關(guān)蛋白表達水平降低;LSD1的表達沒有變化,而其底物 H3K4的雙甲基化水平升高。運用shRNA-LSD1干擾 ECa109細胞中LSD1的表達后mTORC1,mTORC2通路相關(guān)蛋白表達水平降低。
  3.用雷帕霉素以及PP242分別處理ECa109細胞后均檢測到LSD1表達水平降低。
  結(jié)論:
  1. LSD1在五株不同食管鱗癌細胞 TE-1、ECa109、KYSE45

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