樹(shù)鼩骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞分化的研究.pdf

1、目前治療各種因素導(dǎo)致的重癥肝病的最好手段一直是原位肝移植，但長(zhǎng)期以來(lái)肝供體的缺乏和免疫排斥引起的一系列問(wèn)題極大的限制了該手術(shù)的運(yùn)用，同時(shí)，基于原代肝細(xì)胞難于培養(yǎng)且易在培養(yǎng)過(guò)程中變異的特性，制約了其在肝臟相關(guān)藥物的篩選中的作用，而隨著骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的研究的深入，越來(lái)越多的證據(jù)表明骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有向肝細(xì)胞分化的潛能。因此，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化而成的肝樣細(xì)胞在再生醫(yī)療和藥物篩選領(lǐng)域具有較好的運(yùn)用前景。而樹(shù)鼩作為一種新型的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，目

2、前尚無(wú)該方面的報(bào)道，因此為將樹(shù)鼩骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為肝樣細(xì)胞，我們從幼年中緬樹(shù)鼩骨髓中分離并經(jīng)成脂和成骨誘導(dǎo)驗(yàn)證后獲得了純度及活性較高的樹(shù)鼩骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，并對(duì)樹(shù)鼩骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法進(jìn)行了改進(jìn)。同時(shí)我們從樹(shù)鼩肝組織中克隆得到了HGF全長(zhǎng)編碼序列并進(jìn)行分子特征分析，確定了樹(shù)鼩HGF與人的相似性，并在上面兩項(xiàng)基礎(chǔ)上，采用三步誘導(dǎo)法(EGF、bFGF;bFGF、HGF、尼克酰胺;OSM、Dex、ITS+premix)成功將樹(shù)鼩