NF-кB信號(hào)通路在誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞分化中的表達(dá).pdf

1、目的：研究nuclear factor-kappa B(NF-кB)信號(hào)通路在肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、β-神經(jīng)生長(zhǎng)因子(β-NGF)、肝組織液介導(dǎo)下髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝樣細(xì)胞定向分化的作用。
　　方法：全骨髓貼壁法分離大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，使用10％胎牛血清的DMEM低糖培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，將傳至第三代的髓間充質(zhì)干細(xì)胞分成8組：誘導(dǎo)對(duì)照組，HGF誘導(dǎo)組，β-NGF誘導(dǎo)組，肝組織液(LTF)誘導(dǎo)組，抑制對(duì)照組，HGF抑制誘導(dǎo)組，β-NG

2、F抑制誘導(dǎo)組，肝組織液(LTF)抑制誘導(dǎo)組。分別加入等量含血清培養(yǎng)液，HGF，β-NGF，肝組織液誘導(dǎo)劑，BAY11-7082(NF-кB抑制劑)，HGF和BAY11-7082，β-NGF和BAY11-7082，肝組織液誘導(dǎo)劑和 BAY11-7082。20天后進(jìn)行吲哚靛青綠（ICG）攝取檢測(cè)已分化的肝細(xì)胞，免疫熒光染色檢測(cè)NF-кB，蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)NF-кB和AAT的表達(dá)。
　　結(jié)果：HGF誘導(dǎo)組、β-NGF誘導(dǎo)組和肝組織液(LT

3、F)誘導(dǎo)組中出現(xiàn)分化成圓形的肝細(xì)胞，可以攝取ICG，免疫印跡檢測(cè)顯示alpha-1-antitrypsin(AAT)表達(dá)，并且免疫熒光檢測(cè)顯示NF-кB已被激活移位至胞核，而HGF抑制誘導(dǎo)組，β-NGF抑制誘導(dǎo)組，肝組織液(LTF)抑制誘導(dǎo)組吲哚靛青綠陽性率和AAT表達(dá)量顯著性降低，免疫熒光檢測(cè)和免疫印跡檢測(cè)結(jié)果顯示NF-кB陽性率和表達(dá)量分別對(duì)比HGF誘導(dǎo)組，β-NGF誘導(dǎo)組和肝組織液(LTF)誘導(dǎo)組也顯著性降低。
　　結(jié)論：H