基于Klotho基因多態(tài)性對糖尿病腎病中醫(yī)證候的研究.pdf

1、糖尿病腎?。―N）是糖尿病最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，目前認(rèn)為遺傳背景在DN的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色。因此，從遺傳學(xué)角度闡述DN及其風(fēng)險因素對疾病的診斷和臨床治療均意義重大。
　　目的：
　　研究Klotho基因多態(tài)性與2型糖尿病、糖尿病腎病發(fā)病風(fēng)險及糖尿病腎病患者中醫(yī)癥狀、證候分型之間的關(guān)聯(lián)，篩選可能的易感基因型，以期對潛在的高?；颊呒皶r進(jìn)行針對性的防治；在第一部分研究結(jié)果基礎(chǔ)上，進(jìn)一步系統(tǒng)評價中醫(yī)藥治療糖尿病腎病的療效及

2、安全性。
　　方法：
　　1、本研究共采集分析了178例受試者，均為湖北地區(qū)漢族人群，其中病例組123例（2型糖尿病患者56例，2型糖尿病腎病患者67例），健康對照組55例。對受試者進(jìn)行一般資料的采集、中醫(yī)證候?qū)W觀察，運(yùn)用離心柱法提取血液基因組DNA。通過美國國家生物信息中心的GenBank獲取Klotho基因信息及啟動子區(qū)域G-395A及外顯子區(qū)域F352V、C370S的序列。采用PCR聯(lián)合直接測序技術(shù)檢測上述位點(diǎn)單核苷酸

3、多態(tài)性（SNP）。SPSS軟件統(tǒng)計分析Klotho SNP在2型糖尿病、糖尿病腎病人群中的基因型、等位基因分布特征，并探討Klotho SNP與糖尿病，糖尿病腎病的發(fā)病有無相關(guān)性，進(jìn)一步分析糖尿病腎病患者Klotho基因多態(tài)性與主要中醫(yī)癥狀及各證候分型之間的關(guān)系。
　　2、電子檢索外文數(shù)據(jù)庫PubMed、EMBASE、Cochrane圖書館，及中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)庫、維普數(shù)據(jù)庫，并輔以手工檢索，全面

4、收集溫陽活血利水法治療糖尿病腎病的隨機(jī)對照臨床研究，檢索時間截止于2016年4月1日，對符合標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)采用RevMan5.3軟件進(jìn)行Meta分析。
　　結(jié)果：
　　1、Klotho基因G-395A位點(diǎn)共檢測出三種基因型，F(xiàn)352V與C370S僅檢測出兩種基因型。
　　2、G-395A基因型及等位基因分布頻率在病例組和健康對照組間無統(tǒng)計學(xué)差異(X2=1.197，P=0.274；X2=1.083 P=0.298)；而在2型

5、糖尿病組和糖尿病腎病組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X2=5.016，P=0.025，OR=2.475，95％CI：1.108~5.528；X2=5.872，P=0.015，OR=2.404，95%CI：1.166~4.956)；糖尿病腎病患者G-395A基因型分布頻率與Mogensen分期無關(guān)(Z=0.123， P>0.05)；Logistic回歸分析結(jié)果：攜帶A等位基因、高血壓病史、糖尿病病程及糖化血紅蛋白與DN的發(fā)生有統(tǒng)計學(xué)關(guān)聯(lián)（OR

6、依次為1.774、2.198、1.735、1.306，95%CI依次為1.195-2.635、1.330-3.632、1.183-2.548、1.022-1.671）。
　　3、糖尿病腎病組三種中醫(yī)證候分型間G-395A的基因型及等位基因頻率分布有顯著差別，具有統(tǒng)計學(xué)意義（X2=8.700，P=0.013；X2=6.591 P=0.037）；其中GA+AA基因型、A等位基因分布頻率均為：陰陽俱虛型<氣陰兩虛型<脾腎陽虛型；每兩組基

7、因型GA+AA的分布進(jìn)行比較，氣陰兩虛組與脾腎陽虛組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X2=6.551，P=0.01)，陰陽俱虛組與脾腎陽虛組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X2=6.866，P<0.01)，而氣陰兩虛組與陰陽俱虛組比較，差別無統(tǒng)計學(xué)意義（X2=0.015，P>0.05）；每兩組G-395A等位基因頻率分布進(jìn)行比較，氣陰兩虛組與脾腎陽虛組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X2=4.73，P<0.05)，陰陽俱虛組與脾腎陽虛組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(X2=4

8、.86，P<0.05)，而氣陰兩虛組與陰陽俱虛組比較，差別無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）
　　4、不同基因型、攜帶不同等位基因的DN患者水腫輕重程度有差別，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Z=2.951，P=0.003；Z=2.549，P=0.011），并未發(fā)現(xiàn)G-395A多態(tài)性與乏力、腰膝酸軟、納差脘痞這些癥狀的輕重存在統(tǒng)計學(xué)關(guān)聯(lián)（P>0.05）。
　　5、共納入16個臨床隨機(jī)對照試驗(yàn)，合計1107例糖尿病腎病患者。Meta分析結(jié)果顯示：

9、溫陽活血利水法為主的中西醫(yī)結(jié)合試驗(yàn)組治療糖尿病腎病顯效率、總有效率優(yōu)于西醫(yī)常規(guī)對照組（RR=1.97，95%CI1.50～2.59，Z=4.86，P<0.00001；RR=1.48，95%CI1.35～1.62，Z=8.58，P<0.00001）；試驗(yàn)組較對照組降低血肌酐、尿素氮更為明顯（MD=-32.33，95%CI-58.20～-6.47，Z=2.45，P=0.01；MD=-2.20，95%CI-4.13～-0.26，Z=2.22，

10、P=0.03）；升高高密度脂蛋白效果更好（MD=0.16，95%CI0.09～0.23，Z=4.33，P<0.0001）；降低膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白效果更為明顯（MD=-0.82，95%CI-1.28～-0.36，Z=3.49，P=0.0005；MD=-0.40，95%CI-0.53～-0.26，Z=5.95，P<0.0001；MD=-0.49，95%CI-0.76～-0.21，Z=3.46， P=0.0005）；減少尿蛋白效果

11、更明顯（MD=-0.46，95%CI-0.61～-0.31，Z=6.01，P<0.00001）；在控制空腹血糖及改善糖化血紅蛋白方面更明顯（MD=-0.34，95% CI-0.57～-0.12，Z=3.00，P=0.003；MD=-0.31，95%CI-0.50～-0.12，Z=3.15，P=0.002）；而在降低腫瘤壞死因子-α水平方面療效相當(dāng)（P=0.33）。
　　結(jié)論：
　　1、G-395A三種基因型在湖北地區(qū)漢族人群

12、中的分布具有良好的群體代表性，F(xiàn)352V與C370S多態(tài)性較為罕見。
　　2、本課題未發(fā)現(xiàn)G-395A位點(diǎn)多態(tài)性與2型糖尿病的發(fā)病風(fēng)險存在關(guān)聯(lián)性；Klotho G-395A多態(tài)性與糖尿病腎病病情輕重程度無關(guān)；A等位基因的出現(xiàn)可能增加了2型糖尿病患者發(fā)生腎損害的風(fēng)險，攜帶A等位基因可能是湖北地區(qū)漢族人群2型糖尿病患者合并腎臟并發(fā)癥的獨(dú)立危險因素之一，而雜合型GA及純合突變AA基因型可能是糖尿病腎病的遺傳易感危險性基因型。同時，糖化血

13、紅蛋白、糖尿病病程、高血壓病史可能是2型糖尿病腎病發(fā)病的獨(dú)立危險因素。
　　3、GA、AA基因型可能是脾腎陽虛的糖尿病腎病患者的易感基因型；攜帶A等位基因的糖尿病腎病患者可能更易演變?yōu)槠⒛I陽虛，攜帶A等位基因可能是脾腎陽虛型糖尿病腎病的風(fēng)險因素之一。
　　4、GA、AA基因型可能是水腫程度較重的糖尿病腎病患者的易感基因型；攜帶A等位基因的糖尿病腎病患者可能更易出現(xiàn)水腫加重。
　　5、溫陽活血利水法為主的中西醫(yī)結(jié)合試驗(yàn)組