類植物乳桿菌所產(chǎn)活性物質(zhì)LPX-600的研究.pdf

1、從辣白菜、酸奶等12種發(fā)酵食品中分離出420株乳酸菌，通過瓊脂點擴散交叉拮抗試驗從中篩選出一株對沙門氏菌有明顯抗性的乳酸菌，該菌株菌落較小、圓形、淡乳白色、邊緣整齊光滑，單生、成對生或短鏈狀，兼性厭氧；革蘭氏染色呈陽性、無芽孢。經(jīng)API生理生化反應(yīng)、16SrDNA同源性分析鑒定該菌株為類植物乳桿菌X-600。 通過硫酸銨沉淀或正丁醇提取、陽離子交換層析、凝膠過濾、反相高效液相色譜等分離純化過程，從類植物乳桿菌的發(fā)酵液中分離純化出

2、一種活性物質(zhì)LPX-600。比較硫酸銨沉淀和正丁醇提取兩種粗提方法發(fā)現(xiàn)，相比于硫酸銨沉淀，正丁醇提取活性物質(zhì)的效果更好，兩種分離方法最終的活力回收率分別為1.02﹪和0.54﹪。純化的活性物質(zhì)經(jīng)高效液相鑒定其純度達到95﹪以上，經(jīng)透析和凝膠過濾層析判斷其分子量大約在600～1,000Da。 LPX-600在酸性條件下活性較高，對熱穩(wěn)定(121℃，15min部分失活)，在蛋白酶K、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶作用下不失活，TricineS

3、DS-PAGE檢測發(fā)現(xiàn)凝膠上沒有清晰的條帶，因此判斷該活性物質(zhì)不是蛋白或多肽，LPX-600抑菌譜較寬，對沙門氏菌、變形桿菌、金黃色葡萄球菌、粘性沙雷氏菌、肺炎克雷伯氏菌等多種革蘭氏陽性和陰性致病菌有很強的抑菌活性，與乳酸鏈球菌素、乳酸、檸檬酸相比，LPX-600對沙門氏菌具有更明顯的抑菌效果。 將類植物乳桿菌發(fā)酵液噴灑于接種沙門氏菌的新鮮豬肉上，分別在常溫和低溫貯藏，在貯藏期間，抽樣考察發(fā)酵液對新鮮豬肉的抑菌效果，并對豬肉的p

4、H、水分含量、感官質(zhì)量等指標進行評價。結(jié)果表明：發(fā)酵液在常溫和低溫時均能夠顯著抑制沙門氏菌的生長；與對照組相比，經(jīng)發(fā)酵液處理的豬肉表面顯微酸性，豬肉的水分含量隨貯藏時間的延長略有降低，發(fā)酵液對新鮮豬肉的感官質(zhì)量無不良影響，經(jīng)發(fā)酵液處理的豬肉的感官質(zhì)量要明顯好于未經(jīng)處理的豬肉。綜合考察不同濃度的類植物乳桿菌發(fā)酵液的作用效果，發(fā)現(xiàn)2倍稀釋的類植物乳桿菌發(fā)酵液為最適濃度，能夠有效抑制沙門氏菌的生長，延長豬肉的貨架期，而且可以改善豬肉的風味和感