PPARγ通路參與電針預(yù)處理對(duì)急性肺損傷的保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制.pdf

1、背景：急性肺損傷（ALI）是由各種直接、間接致病因素如嚴(yán)重感染、休克、創(chuàng)傷、吸入有害氣體、中毒等非心源性因素導(dǎo)致的急性、進(jìn)行性、缺氧性呼吸功能不全，其嚴(yán)重形式為急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)。它是由于局部（肺部）或其它臟器（系統(tǒng)）炎癥反應(yīng)嚴(yán)重失調(diào)導(dǎo)致肺泡上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障損傷，從而引起急性炎癥和富含蛋白的肺水腫。大量的研究證據(jù)顯示炎癥反應(yīng)平衡的紊亂是導(dǎo)致急性肺損傷的主要機(jī)制之一。目前在臨床上治療ALI除機(jī)械通氣效果較明確外，其他

2、方面尤其是藥物治療，尚無(wú)較為有效的治療手段，故死亡率一直居高不下，因此預(yù)防和治療急性肺損傷是圍術(shù)期臟器保護(hù)的重要研究方向。近年來，研究發(fā)現(xiàn)過氧化物酶增殖體激活受體(PPARγ)具廣泛的抗炎和臟器保護(hù)作用，是機(jī)體重要的抗炎系統(tǒng)，且PPARγ與NF-κB促炎系統(tǒng)關(guān)系密切，相互作用，構(gòu)成炎癥信號(hào)調(diào)節(jié)通路，共同維護(hù)機(jī)體炎癥反應(yīng)的平衡。我們前期研究發(fā)現(xiàn)穴位電針預(yù)處理可減輕急性肺損傷的程度，但具體機(jī)制尚不清楚，可能與調(diào)控PPARγ-NF-κB炎癥反

3、應(yīng)調(diào)節(jié)通路有關(guān)。
　　目的：⑴通過觀察PPARγ及下游靶分子NF-κB及相關(guān)炎癥因子的變化，明確電針預(yù)處理對(duì)急性肺損傷的影響，確定PPARγ-NF-κB調(diào)節(jié)通路在急性肺損傷過程中的變化規(guī)律及穴位電針預(yù)處理的干預(yù)作用。⑵進(jìn)一步闡明ALI的炎癥失控機(jī)制，闡明穴位電針預(yù)處理對(duì)急性肺損傷的保護(hù)作用及內(nèi)在機(jī)制，為ALI的治療提供新思路。
　　方法：①建立內(nèi)毒素脂多糖致大鼠急性肺損傷模型。比較LPS刺激后不同時(shí)間對(duì)大鼠的影響。②比較空白

4、對(duì)照組、急性肺損傷組、電針預(yù)處理組、羅格列酮預(yù)處理組和 GW9662阻斷劑組各組之間的差異。觀察電針刺激合谷穴對(duì)急性肺損傷的保護(hù)作用:肺組織病理學(xué)評(píng)分、肺組織濕干重比(W/D)、動(dòng)脈血?dú)夥治?。③采用?nèi)毒素脂多糖致大鼠急性肺損傷模型。比較空白對(duì)照組、急性肺損傷組、電針預(yù)處理組、羅格列酮預(yù)處理組和GW9662阻斷劑組各組之間的差異。觀察電針刺激合谷穴對(duì)炎癥因子的抑制作用:肺泡灌洗液ELISA測(cè)定TNF-α、IL-6和IL-1β細(xì)胞因子。④收

5、集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肺組織樣本，探討PPARγ-NFκ通路參與電針預(yù)處理對(duì)急性肺損傷的保護(hù)機(jī)制:使用Westernblot檢測(cè)肺組織PPARγ、NF-κB蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：⑴LPS刺激引起大鼠PaO2逐漸降低，于滴注LPS后4小時(shí)降至最低值;肺組織病理學(xué)評(píng)分和肺組織W/D均呈時(shí)間依賴性地升高，在滴注LPS后4小時(shí)達(dá)峰值。⑵病理切片示電針合谷穴預(yù)處理組的肺損傷程度較急性肺損傷組輕，且病理評(píng)分也證實(shí)這一結(jié)果。羅格列酮預(yù)處理組的肺損傷程度

6、也較急性肺損傷組輕，減輕的程度與電針預(yù)處理組相似。另外，通過對(duì)W/D比的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，電針預(yù)處理組的肺水腫程度比急性肺損傷組輕。羅格列酮組的肺損傷程度比急性肺損傷組輕。⑶通過對(duì)肺泡灌洗液ELISA測(cè)定，電針合谷穴預(yù)處理組與急性肺損傷組相比對(duì)炎癥因子TNF-α、IL-6和IL-1β有明顯抑制作用(P＜0.05)。羅格列酮組與急性肺損傷組相比也能夠抑制炎癥因子的釋放。⑷Westernblot結(jié)果顯示電針預(yù)處理合谷穴能夠上調(diào)PPAR-γ蛋白的表