2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討轉(zhuǎn)染Jumonji基因?qū)е滦乃ト逯蠺GF-β1和CTGF動態(tài)變化機制。
  方法:實驗比格犬采用隨機分組方法,隨機分為假手術(shù)組(A組):僅植入起搏器,不行右心室快速持續(xù)起搏刺激。將造模成功的心衰犬隨機分為2個亞組(B組和C組),每組6只。心衰+AAV9-EGFP組(B組):心衰犬經(jīng)胸腔心包腔內(nèi)注射500μL EGFP(綠色熒光蛋白,滴度1×1012 vg)基因的腺相關(guān)病毒溶液后,再繼續(xù)行右心室快速起搏14天。心衰+A

2、AV9-Jumonji-EGFP組(C組):心衰犬經(jīng)胸腔心包腔內(nèi)注射500μL攜帶Jumonji基因的腺相關(guān)病毒溶液(滴度1×1012 vg)后,再繼續(xù)行右心室快速起搏14天。持續(xù)快速右心室起搏心衰犬模型造模成功后,測量左室射血分數(shù)(Left Ventricular Ejection Fraction,LVEF)、心衰標準平均動脈壓(mean artery pressure,MAP),測定兩組心肌HE染色和電鏡觀察心肌組織病理組織和超微

3、結(jié)構(gòu)改變,酶聯(lián)免疫法檢測犬血清TGF-β1和CTGF,然后采用免疫組化法,RT-PCR和Western blot檢測Jumonji基因和蛋白變化。
  結(jié)果:1.心衰模型制作手術(shù)成功并順利完成實驗。模型組12只犬經(jīng)持續(xù)快過30天快速持續(xù)右心室起搏后比格犬出現(xiàn)不同程度的食欲降低、活動量減少、呼吸頻率加快等心衰癥狀,心衰標準平均動脈壓(mean artery pressure,MAP)<60 mm Hg(1 mm Hg=0.133 k

4、Pa),射血分數(shù)<50%,心肌超微結(jié)構(gòu)顯示:肌溶解,線粒體變長。閏盤扭模糊和不連續(xù)。2.經(jīng)胸腔心包腔注射AAV9-Jumonji-EGFP基因轉(zhuǎn)染后,左右心室冰凍切片均顯示大量綠色熒光蛋白表達,呈強陽性。免疫組化檢測犬左右心室心肌Jumonji表達顯示:可見大量棕色顆粒表達。犬左右心室Jumonji和蛋白表達顯示可見犬左右心室Jumonji與β-actin基因和蛋白比較表達增強。
  結(jié)論:1.快速持續(xù)起搏右心室30天時,心衰+A

5、AV9-Jumonji-EGFP組犬成功制作心衰模型,血清中MAP和LVEF均明顯降低,轉(zhuǎn)染Jumonji基因14天后,MAP和LVEF均恢復(fù)到正常水平,提示Jumonji基因可明顯改善心衰。2.快速持續(xù)起搏心室致心衰犬血清TGF-β1和CTGF比基礎(chǔ)水平明顯升高,研究結(jié)果與上述國外臨床及基礎(chǔ)研究結(jié)果一致。而給予AAV9-Jumonji后,TGF-β1和CTGF水平明顯下降,結(jié)合MAP和LVEF值下降,結(jié)果顯示,Jumonji基因通過抑

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