常規(guī)樹突狀細(xì)胞啟動和調(diào)控急性肺損傷早期炎癥反應(yīng)的機(jī)制研究及樹突狀細(xì)胞靶向性的免疫調(diào)節(jié)治療探索.pdf

1、目的:
　　 明確肺常規(guī)樹突狀細(xì)胞(cDCs)對急性肺損傷(ALI)早期炎癥反應(yīng)和肺損傷的啟動和調(diào)控效應(yīng)及其具體的作用機(jī)制。
　　 方法:
　　 C57BL/6小鼠隨機(jī)分為正常對照組、0h-ALI組、6h-ALI組、24h-ALI組、FLT3-ligand(FLT3L)預(yù)處理組、來他替尼(lestaurtinib)預(yù)處理組和DMSO對照組，分別給予FLT3L、lestaurtinib預(yù)處理5天后復(fù)制ALI模型，6

2、h或24h后處死小鼠留取肺組織，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測CD11c+CD11b+雙陽性細(xì)胞占肺單個核細(xì)胞的比例評價肺cDCs的數(shù)量，檢測肺cDCs表達(dá)MHCⅡ或CD80的比例評價肺cDCs的成熟程度;ELISA檢測肺IL-6、TNF-α的濃度評價肺部炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度;計算肺濕重/體重比評價肺水腫程度;肺組織HE染色行組織病理學(xué)檢查和肺損傷評分評價肺損傷程度;比色法檢測肺MPO活性評價中性粒細(xì)胞的浸潤;qRT-PCR檢測轉(zhuǎn)錄因子T-bet及GAT

3、A-3mRNA的表達(dá)評價輔助性T細(xì)胞Th1/Th2亞群的漂移;ELISA檢測肺IFN-γ及IL-4水平評價肺組織Th1/Th2型細(xì)胞因子的平衡。
　　 結(jié)果:
　　 6h-ALI組肺cDCs占肺單個核細(xì)胞的比例(％)顯著高于0h-ALI組[(2.25±0.25)vs(0.93±0.40),P＜0.05]及24h-ALI組[(2.25±0.25)vs(1.01±0.28),P＜0.05]，其肺cDCs表達(dá)MHCⅡ的比例(％

4、)亦較0h-ALI組[(55.51±11.72)vs(6.67±0.87),P＜0.05]和24h-ALI組[(55.51±11.72)vs(10.94±2.55),P＜0.05]升<中文標(biāo)題>=高。而與6h-ALI組相比，F(xiàn)LT3L預(yù)處理顯著增加ALI成模后6h肺cDCs占肺單個核細(xì)胞的比例(％)[(6.08±3.16)vs（2.25±0.25），P＜0.05]及其表達(dá)MHCⅡ的比例(％)[(73.15±9.07)vs(55.51±1

5、1.72)，P＜0.05]，還可上調(diào)成模后6h肺組織IL-6水平(P＜0.05)和TNF-α水平(P＜0.05)，并提高肺濕重體重比(P＜0.05)和肺病理損傷評分(P＜0.05)，此外FLT3L預(yù)處理組肺組織MPO活性、T-bet/GATA-3的表達(dá)比例和IFN-γ水平均較6h-ALI組顯著升高(均P＜0.05)。而與DMSO對照組相比，lestaurtinib預(yù)處理顯著降低ALI成模后6h肺cDCs占肺單個核細(xì)胞的比例(％)[(1.

6、41±0.13)vs(2.36±0.27)，P＜0.05]及其表達(dá)MHCⅡ的比例(％)[(41.56±8.18)vs(50.85±6.91)，P＜0.05]，還可下調(diào)成模后6h肺組織IL-6水平(P＜0.05)和TNF-α水平(P＜0.05)，減輕肺濕重體重比(P＜0.05)和肺病理損傷評分(P＜0.05)，此外lestaurtinib預(yù)處理組肺組織MPO活性、T-bet/GATA-3的表達(dá)比例和肺IFN-γ水平均較DMSO對照組顯著下