NLRP1炎性體在阿托伐他汀抑制THP-1巨噬細(xì)胞炎癥因子分泌中的作用研究.pdf

1、目的：NLRP1炎性體是細(xì)胞內(nèi)的多蛋白復(fù)合體，由 NLRP1、Caspase-1和ASC組成?；罨腘LRP1炎性體能促進(jìn)IL-1β和IL-18等炎癥因子的分泌，在動(dòng)脈粥樣硬化等多種炎性疾病中發(fā)揮重要作用。本研究通過(guò)觀察阿托伐他汀對(duì)THP-1巨噬細(xì)胞IL-1β和IL-18分泌的影響及NLRP1炎性體在其中的表達(dá)和調(diào)控作用，探討阿托伐他汀的抗炎機(jī)制，并為深入認(rèn)識(shí)阿托伐他汀的非調(diào)脂作用及臨床聯(lián)合用藥治療動(dòng)脈粥樣硬化提供新依據(jù)。
　　方

2、法：培養(yǎng)THP-1單核細(xì)胞3-4天后，將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞均勻鋪入六孔板，用100 nmol/LPMA刺激細(xì)胞24小時(shí)，使其分化為貼壁的巨噬細(xì)胞，換無(wú)血清1640培養(yǎng)基，加入LPS制備泡沫細(xì)胞，以不同濃度阿托伐他?。?，10，20μmol/L）處理細(xì)胞24小時(shí)，或以10μmol/L阿托伐他汀處理細(xì)胞不同時(shí)間（12，24，48 h），或運(yùn)用siRNA干預(yù)細(xì)胞內(nèi)NLRP1的表達(dá)，分別采用ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清液中IL-1β和IL-18的水

3、平，RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)NLRP1、Caspase-1、ASC的mRNA表達(dá)，Western Blot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)NLRP1、Caspase-1、ASC的蛋白質(zhì)表達(dá)。
　　結(jié)果：與正常對(duì)照組相比，LPS可使 THP-1巨噬細(xì)胞 IL-1β和IL-18水平及NLRP1、Caspase-1、ASC表達(dá)明顯上調(diào)，而加入阿托伐他汀后，IL-1β和IL-18水平及 NLRP1、Caspase-1、ASC表達(dá)則較LPS組顯著下降，且這種效應(yīng)呈