RNA聚合酶Ⅱ轉錄的ALU對細胞凋亡及HBV復制的影響.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩57頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的：研究由RNA聚合酶Ⅱ轉錄的ALU序列對細胞凋亡的影響,探討其與干擾素的關系及對HBV復制的影響。
　　 方法：⑴重組質粒pcDNA3.1-ALU瞬時轉染人胚腎293細胞(ALU-293)；四氮唑藍(MTT)法、Cellular DNA FragmentationELISA檢測法及細胞凋亡的DNA梯帶法(DNA Ladder法)檢測ALU-293,觀察其增殖抑制及凋亡的情況。(3)real time RT-PCR檢測ALU-

2、293細胞β干擾素mRNA的表達水平。⑵重組質粒pcDNA3.1-ALU瞬時轉染HepG22.215細胞(ALU-2.215),real timeRT-PCR檢測ALU-2.215細胞ALU表達水平,ELASA法檢測ALU-2.215細胞上清HBsAg及HBeAg；real time PCR檢測ALU-2.215細胞上清HBV-DNA及ALU.2-215細胞HBV-cccDNA水平。
　　 結果：①MTT法顯示瞬時轉染重組質粒p

3、cDNA3.1-ALU能夠抑制293細胞增殖,Cellular DNA Fragmentation ELISA法檢測顯示ALU-293發(fā)生凋亡,其凋亡與陰性對照存在顯著差異。瓊脂糖凝膠電泳可見陰性對照DNA雙鏈完整,未發(fā)生凋亡,ALU-293出現(xiàn)云梯狀的細胞凋亡DNA ladder,real-time RT-PCR檢測顯示ALU-293β干擾素mRNA的相對表達水平增加。②real time RT-PCR檢測顯示轉染了ALU的2.215

4、細胞中ALU表達水平明顯增加。ELISA法檢測顯示ALU.2-215細胞上清HBsAg及HBeAg降低,與陰性對照組pcDNA3.1-2.215有明顯差異(P＜0.05)。Real time PCR檢測顯示ALU.2-215細胞上清HBV-DNA的拷貝數(shù)低于陰性對照pcDNA3.1-2.215,統(tǒng)計學有顯著差異(P＜0.05),轉染的ALU-2.215與干擾素+2.215 HBV-cccDNA表達水平下調(diào),陰性對照pcDNA3.1-2.

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論