DNA載體pVAX1-IRES和復(fù)制型DNA載體pSFVax1-IRES的構(gòu)建及表達(dá).pdf_第1頁(yè)
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1、二十一世紀(jì)，惡性腫瘤將成為威脅人類(lèi)健康的第一殺手。隨著分子生物學(xué)、免疫學(xué)以及基因技術(shù)的不斷發(fā)展，腫瘤疫苗已經(jīng)成為一種治療惡性腫瘤的重要方法。本研究針對(duì)DNA疫苗在惡性腫瘤治療中展現(xiàn)出來(lái)的優(yōu)勢(shì)，在真核表達(dá)載體pVAXl的基礎(chǔ)之上，引入了內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)(IRES)元件，從而構(gòu)建成功了一種新型 DNA 疫苗載體pVAXl-IRES。結(jié)果顯示：在pVAXl-IRES載體中，IRES序列的上游和下游不僅可以分別表達(dá)，而且可以同時(shí)表達(dá)兩種不同的

2、外源目的基因。本研究進(jìn)一步表明，在載體pVAXl-IRES中，IRES上游基因的表達(dá)強(qiáng)于下游基因的表達(dá)。 同時(shí)，本研究鑒于塞姆利基森林病毒(SFV)具有“自主復(fù)制”的功能，所以在構(gòu)建好的DNA載體pVAXl-IRES的基礎(chǔ)之上，又引入了pSFVl載體的復(fù)制酶編碼基因nsPl-4，從而構(gòu)建成了新型復(fù)制型DNA疫苗載體pSFVaxl-IRES。該載體不僅能夠同時(shí)表達(dá)兩種外源基因，而且由于引入了復(fù)制酶基因，使得該載體在細(xì)胞質(zhì)中可以進(jìn)行

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