細(xì)胞周期調(diào)控蛋白在乙型肝炎病毒相關(guān)性腎炎中表達(dá)及其意義.pdf

1、【目的】
　　 1、觀察細(xì)胞周期調(diào)控蛋白cyclin D1、p27及p57在乙肝相關(guān)性IgA腎病的表達(dá)情況，探討它們在HBV-GN進(jìn)展中的作用。
　　 2、探討人類乙肝病毒DNA陽性血清對體外培養(yǎng)小鼠足細(xì)胞增殖、凋亡及cyclin D1mRNA、p27mRNA表達(dá)的影響，并初步探討其臨床意義。
　　 【方法】
　　 1、采用免疫組化方法檢測29例HBV-IgAN和32例pIgAN患者腎活檢組織中cycli

2、n D1、p27及p57的表達(dá)情況，并對其表達(dá)程度進(jìn)行半定量評分，分析其變化與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。
　　 2、以體外培養(yǎng)的小鼠腎小球足細(xì)胞為對象,分別用健康人血清、攜帶HBV無腎損害者和HBV-GN患者HBV-DNA陽性血清刺激，采用噻唑藍(lán)比色法（MTT）檢測各組足細(xì)胞增殖水平，磷脂酰絲氨酸外翻分析（Annexin V法）檢測各組足細(xì)胞凋水平，逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測各組足細(xì)胞cyclin D1mRNA、p27

3、mRNA的表達(dá)水平。
　　 【結(jié)果】
　　 1、隨著腎小球病變程度和系膜增殖程度的逐級加重，腎小球中p27表達(dá)逐漸下調(diào)，cyclin D1逐漸上調(diào)，HBV-IgAN和pIgAN之間沒有顯著差異；p57在正常腎組織中表達(dá)最高，與正常組相比，pIgAN II級組無明顯變化，HBV-IgAN II級組表達(dá)明顯下調(diào)(P<0.05)，pIgAN和HBV-IgAN III～I(xiàn)V級組表達(dá)最弱。腎小球發(fā)生球囊粘連、硬化時，p27和p57

4、表達(dá)均下調(diào)，cyclin D1表達(dá)上調(diào)；腎小球發(fā)生新月體時，腎小球p57的表達(dá)明顯下調(diào)，而p27和cyclin D1無明顯變化，兩種疾病之間沒有顯著差異。在pIgAN中，與單純血尿組和血尿伴蛋白尿組比較，腎小球p27在腎病綜合征(NS)組中表達(dá)下調(diào)，cyclin D1表達(dá)上調(diào)，但HBV-IgAN中無此現(xiàn)象。腎小球中p57的表達(dá)在HBV-IgAN中NS組顯著低于血尿+蛋白尿組，在pIgAN中血尿+蛋白尿組顯著低于單純血尿組。腎小球p57在

5、>1.0g/24h組的表達(dá)顯著低于≤1.0g/24h組，兩組疾病間無明顯差異。
　　 2、人類HBV-DNA陽性血清能明顯刺激小鼠分化足細(xì)胞的增生，與正常血清組比較，HBV-DNA拷貝數(shù)<103copy/ml的HBV-GN組對足細(xì)胞的ODA490值無明顯影響，HBV-DNA拷貝數(shù)為104copy/ml和106copy/ml的HBV-GN組和HBV-DNA拷貝數(shù)為106copy/ml的無腎損害組均能顯著刺激足細(xì)胞發(fā)生增殖，后三組之

6、間比較無統(tǒng)計學(xué)意義。人類HBV-DNA陽性血清對小鼠足細(xì)胞的凋亡無明顯影響。與正常人血清組比較， HBV-GN三種不同濃度組和HBV無腎損害高濃度組對小鼠足細(xì)胞cyclin D1mRNA的表達(dá)無明顯影響，但可明顯下調(diào)足細(xì)胞p27mRNA的表達(dá)，四組間無顯著差異。
　　 【結(jié)論】
　　 1、足細(xì)胞p57表達(dá)的下調(diào)在HBV-IgAN疾病早期即可出現(xiàn)，而在pIgAN早期并不明顯。足細(xì)胞的損傷可能是HBV-IgAN早期疾病進(jìn)展的

7、重要機制之一。
　　 2、p27和cyclin D1在HBV-IgA腎病和pIgA腎病的病理進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。P27下調(diào)和cyclin D1上調(diào)具有協(xié)同作用，二者共同導(dǎo)致腎小球發(fā)生系膜增殖，促進(jìn)球囊粘連和腎小球硬化。
　　 3、p57可能參與腎小球足細(xì)胞的損傷過程，其表達(dá)水平的下調(diào)可促進(jìn)蛋白尿形成，促使腎小球發(fā)生球囊粘連、硬化及新月體形成。
　　 4、人類HBV-DNA陽性血清可刺激小鼠分化足細(xì)胞發(fā)生增殖，但對