豬鏈球菌2型Ⅲ型限制與修飾系統(tǒng)mod基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究.pdf

1、分類號華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬鏈球菌2型nl型限制與修飾系統(tǒng)mod基因缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究ConstruetionandeharacteristieoftyPe111restrietion一modification(R一M)systemsmodgenemutantstrainofs?！?PtococcussuisserotyPeZ研究生:劉朋指導(dǎo)教師:金梅林教授指導(dǎo)小組:陳煥春教授金梅林教授一郭愛珍教授周一銳教授貝為成副教授

2、專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)獲得學(xué)位名稱:農(nóng)學(xué)碩士研究方向:動物傳染病獲得學(xué)位時間:2010年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院二O一O年六月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2010屆碩士學(xué)位論文2.3.6載體的去磷酸化..................................................................................……282.3.7連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化................................

3、..................................................……282.3.8質(zhì)粒小量提取......................................................................................……292.3.9重組載體的鑒定.....................................................

4、.............................……292.3.10抗性篩選基因一紅霉素抗性基因的擴增........................................……292.3.n自殺性重組質(zhì)粒的構(gòu)建...................................……，.……‘..................……292.3.12自殺性重組質(zhì)粒的快速PCR鑒定.…，.................

5、.....……，................……302.3.13自殺性重組質(zhì)粒的酶切鑒定............................................................……302.3，14互補質(zhì)粒的構(gòu)建.........……，................................................................……302.3.15互補質(zhì)粒的快速PCR鑒

6、定................................……，.……，..…，，.…‘二，.，…，302.3.16互補質(zhì)粒的酶切鑒定........................................................................……302.3.17自殺性重組質(zhì)粒和互補質(zhì)粒的大量提取........................................……302.3.18

7、豬鏈球菌2型RNA的提取.............................................................……312.3.19豬鏈球菌2型mod基因缺失突變株和互補菌株的構(gòu)建及鑒定..……322.3.20豬鏈球菌2型mod基因缺失株的Southem雜交鑒定.................……352.3.21mod基因缺失菌株和互補菌株的生物學(xué)特性研究..…，..................…

8、…382.3.22mod基因?qū)毦玖Φ挠绊?...........................................................……402.3.23Agllent基因表達譜芯片(雙標(biāo))制備與分析，.................................……413結(jié)果與分析..................……、........................................

9、......................................……453.1豬鏈球菌2型mod基因缺失菌株和互補菌株的篩選與鑒定...................……453.1.1豬鏈球菌2型mod基因缺失菌株的構(gòu)建及PCR鑒定....................……453.1.2豬鏈球菌2型mod基因缺失菌株的PCR鑒定，..…，…，…，.................……453.1.3mod基因缺失菌株的So

10、uthemblot鑒定..........................................……463.1.4mod基因互補菌株的構(gòu)建及PCR鑒定.............................................……473.1.5mod基因互補菌株的功能鑒定...............................................……，....……473.2豬鏈球菌2型mod基因

11、缺失菌株和互補菌株的生長特性試驗..............……483.3野生株，突變株和互補菌株的形態(tài)結(jié)構(gòu)比較....……，.................’................……493.3.1革蘭氏染色比較…，....................................................................……，...……493.3.2掃描電子顯微鏡的觀察(SEM).......

12、..............................................……493.3.3透射電子顯微鏡的觀察(TEM).....................................................……503.4mod基因的缺失對細菌毒力的影響..……，...................................................……513.4.1仔豬的感染試驗..

13、................................................................................……513.4.2競爭感染試驗......................................................................................……523.5野生株SC一19和突變株△mod的表達譜差異分析二，......