TIEG特異的RNAi慢病毒載體的構建及鑒定.pdf

1、細胞外基質(extracellular matrix ECM)過度聚集是腎間質纖維化的病理基礎。在腎間質纖維化進程中，腎小管上皮細胞向肌成纖維母細胞轉分化及細胞外基質合成增加起著至關重要的作用。眾多的研究證明轉化生長因子-β(TGF—β)是最強的致纖維化生長因子，與多種纖維化相關疾病的發(fā)病密切相關。TGF—β的生物學效應主要通過細胞內Smad信號蛋白介導，其中受體調節(jié)Smad(Smad2，Smad3)發(fā)揮正性調節(jié)作用，抑制性Smad(S

2、mad7)發(fā)揮負性調節(jié)作用。前期的研究表明采用基因轉染技術上調Smad7表達，可有效抑制高糖和糖基化終產(chǎn)物誘導的腎小管上皮細胞轉分化及細胞外基質合成。因此， TGF—β／Smad信號通路可作為防治腎間質纖維化的潛在靶位。 TIEG(TGF—β誘導早期基因)蛋白屬于SP1樣蛋白家族的新成員，是TGF—β誘導的早期轉錄因子蛋白，參與調節(jié)TGF—β靶基因的表達。TIEG的這種效應主要源于對Smad信號蛋白的調節(jié)作用：一方面TIEG能夠

3、與Smad7啟動子中的GC序列相結合，抑制負反饋調節(jié)因子Smad7表達；另一方面通過促進受體調節(jié)性Smad2的表達。TIEG增強TGF—β／Smad信號通路正性調節(jié)作用，和減弱負性調節(jié)作用的雙重作用，對TGF—β／Smad信號通路活化發(fā)揮著顯著的增強效應。因此，通過下調TIEG表達抑制TGF—β／Smads信號通路活化，可望抑制或阻斷糖尿病腎病腎間質纖維化進程，改善糖尿病腎病的預后。本課題擬通過RNA干擾技術沉默TIEG基因，為后期構建