C3aRA、C5aRA對IgA1刺激的人腎小球系膜細胞增殖及IL-6、MCP-1表達的影響.pdf

1、目的：利用IgA1分子刺激人腎小球系膜細胞，觀察補體C3a、C5a受體拮抗劑（C3aRA、C5aRA）對其增殖及炎癥因子 IL-6、MCP-1表達的影響，以進一步了解補體參與IgA腎病的作用機制。
　　方法：⑴利用MTT法檢測IgA1在不同濃度及孵育時間對人腎小球系膜細胞（HMCs）增殖的影響。⑵將HMCs分為四組（空白對照組、IgA1組、IgA1+C3aRA組、IgA1+C5aRA組），MTT法檢測C3aRA、C5aRA對IgA

2、1刺激的HMCs增殖的影響；熒光定量PCR（RT-qPCR）、Western blot檢測各組細胞C3aR、C5aR mRNA及蛋白表達情況。⑶將HMCs分為兩大組：第一組（空白對照組、C3a組、IgA1+C3a組、IgA1+C3a+C3aRA組）和第二組（空白對照組、C5a組、IgA1+C5a組、IgA1+C5a+C5aRA組），RT-qPCR、Western blot檢測各組細胞IL-6、MCP-1 mRNA及蛋白表達情況。

3、　　結果：①MTT結果顯示：不同濃度的IgA1對 HMCs增殖作用的影響不同，10μg/mL-100mg/mL的IgA1均可以刺激 HMCs的增殖，其中以1mg/mL和100μg/mL IgA1對HMCs增殖的刺激作用最強（P＜0.001）；100μg/mL IgA1刺激HMCs不同時間（6-48h）后其增殖均可出現(xiàn)增強，其中24h時對HMCs增殖的刺激作用最為明顯（P＜0.001）。②MTT結果顯示：與對照組相比，IgA1組細胞增殖明

4、顯增強（P＜0.001），而在分別給予C3aRA、C5aRA干預后，C3aRA組和C5aRA組細胞的生長增殖受到一定程度的抑制（P＜0.05）；RT-qPCR與Western blot結果顯示：IgA1上調(diào)HMCs C3aR、C5aR mRNA與蛋白表達（P＜0.001），而在分別給予C3aRA、C5aRA干預后，HMCs C3aR、C5aR mRNA及蛋白表達明顯減少（P＜0.05）。③RT-qPCR與 Western blot結果顯

5、示：IgA1、C3a、C5a可以刺激HMCs IL-6、MCP-1 mRNA與蛋白的表達，但作用較弱（P＜0.05），IgA1與C3a、C5a分別共同作用對HMCs IL-6、MCP-1 mRNA與蛋白表達的刺激作用較強（P＜0.05），C3aRA、C5aRA可以減弱IgA1與C3a、C5a對HMCs IL-6、MCP-1 mRNA與蛋白表達的刺激作用（P＜0.05）。
　　結論：⑴IgA1可刺激HMCs的增殖，且其增殖作用可被