十子代平方改善IR-HepG2細(xì)胞的胰島素抵抗及對肝糖原含量、HK、PK、GLUT-2的影響.pdf

1、目的：通過檢測葡萄糖消耗量、細(xì)胞增殖、肝糖原含量、已糖激酶（HK）活性、丙酮酸激酶（PK）活性以及GLUT-2的蛋白表達(dá)，觀察十子代平方改善高胰島素誘導(dǎo)的IR-HepG2細(xì)胞模型胰島素抵抗的作用，并且初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：1采用高濃度胰島素體外誘導(dǎo)法，建立HepG2細(xì)胞的胰島素抵抗模型，并通過MTT法檢測HepG2細(xì)胞的增殖，以葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法（GOD-POD法）檢測細(xì)胞的葡萄糖消耗量，進(jìn)而篩選出最佳的造模濃度

2、及造模時(shí)間。2檢測十子代平方對IR-HepG2細(xì)胞模型的葡萄糖消耗量及對細(xì)胞增殖的影響，篩選出最佳的十子代平方給藥濃度。3檢測十子代平方對IR-HepG2細(xì)胞模型的HK活性、PK活性及肝糖原含量的影響；同時(shí)應(yīng)用Western-blot法檢測其對IR-HepG2細(xì)胞模型的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2（GLUT-2）蛋白表達(dá)水平的影響。
　　結(jié)果：1通過MTT法測定1×10-5~1×10-10 mol·L-1濃度胰島素對細(xì)胞增殖沒有影響；通過各組

3、細(xì)胞葡萄糖消耗量的差異篩選出最佳的造模濃度為1×10-7 mol·L-1，最佳造模時(shí)間為36h。2各濃度十子代平方對IR-HepG2細(xì)胞模型的增殖沒有影響（P＞0.05），各組細(xì)胞的存活率均大于90％；與模型組比較，各濃度十子代平方干預(yù)IR-HepG2細(xì)胞模型后，葡萄糖消耗量都有明顯增加（P＜0.01），其中十子代平方濃度在100μg·ml-1時(shí)效果最為明顯。3與正常組比較，模型組的肝糖原含量、HK活性、PK活性均明顯下降（P＜0.05

4、）；十子代平方組明顯增加肝糖原含量，提高HK活性、PK活性，與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與正常組比較則無明顯差異（P＞0.05）。4 Western blot結(jié)果顯示，與正常組相比較，模型組細(xì)胞的GLUT-2蛋白表達(dá)水平明顯下降（P＜0.05）；與模型組相比較，十子代平方組顯著提高GLUT-2的蛋白表達(dá)水平（P＜0.05）。
　　結(jié)論：1十子代平方可以增加IR-HepG2細(xì)胞的葡萄糖消耗量，且對細(xì)胞的增殖沒有影響，提